抗真菌藥在體外對(duì)棘阿米巴殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：棘阿米巴屬Acanthamoeba spp.的阿米巴是一種自生生活原蟲．廣泛分布于土壤、海水、淡水及腐敗物等自然環(huán)境中，是一種機(jī)會(huì)致病性原蟲。除可引起棘阿米巴性角膜炎(Acanthamoeba Kratits，AK)外，在免疫功能低下的人群中可引起肉芽腫性阿米巴性腦炎(Granulomatous Aoebic Ecephalitis，GAE)、肺部感染、皮膚病變、鼻竇炎以及彌漫性感染。
　　兩性霉素B（amphoterici

2、n B）是廣譜多烯類抗真菌藥。對(duì)新型隱球菌、白色念珠菌、芽生菌、莢膜組織胞漿菌、粗球孢子菌、孢子絲菌等有較強(qiáng)抑菌作用，高濃度時(shí)有殺菌作用。其作用靶點(diǎn)為細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜表面的麥角蛋白結(jié)合，改變細(xì)胞膜的通透性，使鉀鈉滲漏導(dǎo)致細(xì)胞死亡。醋酸卡泊芬凈(caspofungin acetate)是一種棘白菌素類抗真菌藥，藥物作用機(jī)制不同于多烯類和唑類，其靶點(diǎn)為細(xì)胞壁，能抑制細(xì)胞壁中 l，3-β-D-葡聚糖的合成。兩性霉素 B是唯一被確定有抗Naeg

3、leria fowleri阿米巴臨床療效的藥物，但是,對(duì)棘阿米巴作用的報(bào)道很少。臨床上對(duì)棘阿米巴有療效的藥物很少，要得到更有效的治療藥物就必須通過(guò)相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究。因此，本學(xué)位論文，通過(guò)觀察數(shù)量的改變以及形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，分析兩性霉素 B及卡泊芬凈在體外對(duì)棘阿米巴的抑制作用。為臨床應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法：用生理鹽水作為空白對(duì)照組，甲硝唑2.0mg/ml為陽(yáng)性對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組將棘阿米巴分別用0.1μg/ml、1.0μg/ml、5.0

4、μg/ml、10.0μg/ml濃度的兩性霉素B和10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml濃度的卡泊芬凈在體外作用4h、8h、24h、48h和72h時(shí)，在倒置顯微鏡下觀察棘阿米巴的形態(tài)和細(xì)胞數(shù)量的變化情況。
　　結(jié)果：兩性霉素B濃度0.1μg/ml、1.0μg/ml作用4h和8h時(shí)與生理鹽水空白組比較無(wú)明顯抑制作用；5.0μg/ml濃度兩性霉素B在作用的24h時(shí)對(duì)棘阿米巴的生長(zhǎng)有抑制作用(P<0.05)；1

5、0μg/ml濃度兩性霉素B在作用24h時(shí)有明顯的抑制作用(P<0.05)；卡泊芬凈濃度10μg/ml、50μg/ml作用4h和8h時(shí)與生理鹽水空白組相比較無(wú)明顯抑制作用；100μg/ml濃度的卡泊芬凈作用72h時(shí)對(duì)棘阿米巴的生長(zhǎng)有抑制作用(P<0.05);500μg/ml濃度的卡泊芬凈作用的4h以上有明顯的抑制作用(P<0.05)。與甲硝唑陽(yáng)性對(duì)照組相比較，兩性霉素 B0.1μg/ml作用48h時(shí)以上的效果不如甲硝唑；1.0μg/ml兩

6、性霉素B作用效果與甲硝唑相近；10.0μg/ml濃度的兩性霉素B作用24h的效果明顯優(yōu)于甲硝唑。與甲硝唑陽(yáng)性對(duì)照組相比較，卡泊芬凈10μg/ml作用24h時(shí)效果不如甲硝唑；50μg/ml、100μg/ml作用效果與甲硝唑相近；500μg/ml作用的4h以上效果明顯優(yōu)于甲硝唑。
　　結(jié)論：兩性霉素B10.0μg/ml在體外作用24h以上對(duì)棘阿米巴有抑制作用。500μg/ml濃度的卡泊芬凈作用的4h以上有明顯的抑制作用。10.0μg/