柑橘木虱內(nèi)共生菌檢測(cè)與取食時(shí)間對(duì)其獲毒效率的影響.pdf

1、柑橘木虱（Diaphorina citriKuwayama）屬半翅目Hemiptera，木虱科Psyllidae，是蕓香科植物上的重要害蟲。柑橘木虱是柑橘黃龍?。–itrus huanglongbing，HLB）亞洲種“CandidatusLiberibacteria asiticus”和美洲種“CandidatusLiberibacteria americus”在田間傳播的唯一媒介昆蟲。
　　昆蟲體內(nèi)含有大量的內(nèi)共生菌，已有研究

2、表明，柑橘木虱的獲毒效率與其體內(nèi)的內(nèi)共生菌種類與含量密切相關(guān)，然而，迄今為止，柑橘木虱體內(nèi)的共生菌感染情況尚不明確，本文利用分子生物學(xué)手段對(duì)廣東地區(qū)柑橘木虱種群內(nèi)共生菌類群進(jìn)行檢測(cè)，以期為柑橘木虱的生物防治提供新的思路和理論依據(jù)。
　　柑橘黃龍病的田間傳播和流行與木虱的帶菌量及其活動(dòng)有十分密切的關(guān)系，研究取食時(shí)間對(duì)柑橘黃龍病獲菌率的影響是研究柑橘木虱與柑橘黃龍病的互作關(guān)系的重要內(nèi)容之一。因此，本論文在柑橘木虱共生菌檢測(cè)，取食時(shí)間影

3、響木虱獲毒效率方面做了幾個(gè)方面的研究工作。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.柑橘木虱內(nèi)共生菌檢測(cè)
　　本研究應(yīng)用 PCR方法，對(duì)采集自廣東潮州、茂名、江門、佛山、中山、云浮以及廣州等7個(gè)地區(qū)的柑橘木虱種群進(jìn)行內(nèi)共生菌種類和感染率的檢測(cè)。研究結(jié)果顯示，廣東7個(gè)地區(qū)采集的柑橘木虱，在共生菌種類上并無明顯差異，但感染率相差較大。所有柑橘木虱均含有原生共生菌 Carsonella（100％），其余4種共生菌 Wolbachia、Ar

4、senophonus、Profftella、Oxalobacter&Herbaspirillum感染率各不相同。4種共生菌感染率從高到底依次為Profftella95.91%，Wolbachia88.14%，Arsenophonus78.75%，Oxalobacter& Herbaspirillum40.95%。
　　2.柑橘黃龍病病菌的檢測(cè)
　　柑橘黃龍病病菌Ca.L.asiaticus在潮州、茂名、江門、佛山、中山、云浮

5、6個(gè)地區(qū)均有檢出，感染率由高到低依次為云浮93.33%、潮州86.67%、江門83.33%、佛山80.00%、中山66.67%、茂名63.33%，說明柑橘黃龍病在廣東省傳播的范圍已經(jīng)很廣，危害已經(jīng)很嚴(yán)重。
　　3.取食時(shí)間對(duì)柑橘木虱獲取黃龍病菌效率的影響
　　已有結(jié)果表明柑橘木虱在帶病樹葉韌皮部取食1小時(shí)后即可在體內(nèi)檢測(cè)出黃龍病病原，且?guī)Ь上x在柑橘嫩梢上取食5小時(shí)以上即可使得健康苗木感病。但是迄今為止，取食時(shí)間對(duì)柑橘木虱黃

6、龍病獲毒效率的影響機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)按照1、3、5、7、9、11小時(shí)6個(gè)接蟲時(shí)間，早上：7點(diǎn)-15點(diǎn)、下午：15點(diǎn)-23點(diǎn)和晚上：23點(diǎn)-7點(diǎn)3個(gè)時(shí)間段將柑橘木虱接蟲在帶菌柑橘苗上。利用巢式 PCR技術(shù)檢測(cè)不同接蟲時(shí)間單頭柑橘木虱體內(nèi)黃龍病病原。研究結(jié)果表明，接蟲時(shí)間1、3、5、7小時(shí)的接蟲時(shí)間柑橘木虱獲菌率無差異，9小時(shí)和11小時(shí)的接蟲時(shí)間柑橘木虱獲菌率無差異。9小時(shí)和11小時(shí)接蟲時(shí)間和1、3、5、7四個(gè)接蟲時(shí)間的獲毒率存在差異。早