單核細(xì)胞趨化因子(MCP-1)在間質(zhì)性膀胱炎中作用機(jī)制及靶向性治療的研究.pdf

1、背景:單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)對(duì)白細(xì)胞的趨化作用是炎癥發(fā)生過程中重要的起始步驟，MCP-1與CCR2受體結(jié)合后能激活趨化因子受體，趨化單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞甚至肥大細(xì)胞等，釋放一系列的炎癥因子，從而誘導(dǎo)多種炎癥性疾病以及臟器纖維化的發(fā)生。近幾年來國內(nèi)外已有較多研究發(fā)現(xiàn)MCP-1在許多間質(zhì)性臟器病變（間質(zhì)性腎炎、間質(zhì)性肺炎以及肝臟纖維化等）的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要

2、作用，但MCP-1在間質(zhì)性膀胱炎(interstitial cystitis，IC)方面的研究卻是空白。
　　 目的:本部分研究著重探討MCP-1以及其他一些免疫因子在IC患者膀胱組織和尿液中的表達(dá)差異以及分泌MCP-1的部位及細(xì)胞，初步判斷MCP-1能否能作為IC早期診斷的免疫指標(biāo);并進(jìn)一步研究MCP-1與IC患者臨床癥狀嚴(yán)重程度的相關(guān)性，從而有助于對(duì)IC的進(jìn)展、預(yù)后以及臨床治療效果的客觀評(píng)估。
　　 方法:根據(jù)美國N

3、IDDK的IC診斷標(biāo)準(zhǔn)收集40例IC患者和20例正常對(duì)照組。所有IC患者均給于24小時(shí)排尿卡記錄、O'Leary-Sant IC問卷表、鉀離子敏感試驗(yàn)(potassium sensitivity test，PST)和麻醉狀態(tài)下水?dāng)U張后膀胱鏡檢查。通過膀胱鏡檢或輸尿管鏡獲取兩組患者的膀胱組織和尿液樣本，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附ELISA的方法測定兩組尿液中MCP-1以及HB-EGF、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10和I

4、L-12A的水平變化;采用逆轉(zhuǎn)錄酶PCR(RT-PCR)技術(shù)和Western-Blot技術(shù)測定MCP-1以及HB-EGF、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10和IL-12A在兩組膀胱組織中mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)變化;應(yīng)用免疫組化染色觀察MCP-1在IC膀胱組織中的表達(dá)分布;同時(shí)應(yīng)用ROC曲線分析尿液中MCP-1的含量變化，初步得出早期診斷IC的一個(gè)理論上的陽性分界點(diǎn);最后應(yīng)用NPar Tests方法對(duì)MCP

5、-1及IL-6等因子與IC臨床癥狀進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果:ELISA檢測結(jié)果顯示，IC患者尿液中MCP-1表達(dá)較對(duì)照組顯著升高(P＜0.01)，IC患者尿液中IL-6表達(dá)較對(duì)照組也有升高(P＜0.05)，其他各免疫因子（HE-BGF、IL-1、IL-2、IL-4、IL-8、IL-10以及IL-12A）的表達(dá)與正常組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。RT-PCR和Western-Blot方法檢測結(jié)果顯示，IC患者膀胱組織

6、中MCP-1的蛋白水平表達(dá)較對(duì)照組顯著升高(P＜0.01);IL-6的蛋白水平表達(dá)也較對(duì)照組顯著升高（P＜0.01），其他各免疫因子的表達(dá)與正常組之間無明顯差異(P＞0.05)。在免疫組化檢測中發(fā)現(xiàn)MCP-1在膀胱粘膜上皮組織和間質(zhì)組織（血管內(nèi)皮細(xì)胞和纖維母細(xì)胞等）中有較高表達(dá)。對(duì)IC患者尿液MCP-1的ELISA結(jié)果進(jìn)行ROC工作曲線分析，當(dāng)MCP-1在21.229 pg/ml時(shí)，靈敏度達(dá)到97.1％，而特異度可以達(dá)到96.0％，可以

7、作為診斷IC的一個(gè)理論上的陽性分界點(diǎn)。應(yīng)用NPar Tests方法分析MCP-1與IL-6之間存在正相關(guān)，r=0.643，MCP-1與癥狀評(píng)分（嚴(yán)重程度）存在正相關(guān)，r=0.686，IL-6與癥狀評(píng)分（嚴(yán)重程度）也存在正相關(guān)，r=0.516。
　　 結(jié)論: MCP-1可能參與了IC的病理生理過程，其在IC患者尿液和膀胱組織中的高表達(dá)，提示可能作為IC診斷的免疫指標(biāo)之一，將有助于IC的早期診斷、預(yù)后判斷以及臨床治療效果的客觀評(píng)估。