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1、該論文首先研究了兩個(gè)重要順式元件CRE和AP-1位點(diǎn)及相關(guān)的反式作用因子在hsp90β基因表達(dá)調(diào)控中的作用;另外,從染色質(zhì)水平對(duì)hsp90β基因組在組成性、熱誘導(dǎo)和PHA激活表達(dá)條件下DNaseⅠ高敏位點(diǎn)進(jìn)行了分析.一、CRE和AP-1位點(diǎn)及相關(guān)反式作用因子在hsp90β基因表達(dá)調(diào)控中的作用.1.首先構(gòu)建了CRE和AP-1位點(diǎn)系列缺失的CAT和Luc報(bào)告基因質(zhì)粒.2.研究人員隨后分析了CRE相關(guān)的反式作用因子對(duì)hsp90β基因表達(dá)的影響
2、.3.接著人們分析了休克對(duì)CRE相關(guān)因子活性的調(diào)節(jié).4.最后人們研究了PHA對(duì)CRE和AP-1位點(diǎn)相關(guān)因子活性的調(diào)節(jié).二、Jurkat細(xì)胞內(nèi)hsp90β基因的DNaseⅠ高敏位點(diǎn)分析.1.為了分析了hsp90β基因調(diào)控區(qū)(兩個(gè)PstⅠ位點(diǎn)之間區(qū)域,包括5'上游,第一內(nèi)含子等系列)的DNaseⅠ高敏位點(diǎn):首先設(shè)計(jì)引物,利用PCR方法從基因組DNA上擴(kuò)增hsp90β基因第二內(nèi)含子內(nèi)305bp片段作為分析高敏位點(diǎn)的探針.其次用DNaseⅠ處理
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