睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子對不同年齡大鼠坐骨神經(jīng)再生的作用及其機(jī)制.pdf

1、該研究以幼年、成年、老年大鼠坐骨神經(jīng)離斷性損傷為模型,硅膠管連接離斷神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端為模型,分二部分進(jìn)行觀察研究:(一)不同年齡大鼠坐骨神經(jīng)再生中CNTF及CNTFR<,α>的變化.采用免疫組織化學(xué)、Western blotting、原位雜交、RT-PCR檢測CNTF、CNTFR<,α>蛋白及mRNA在脊髓及坐骨神經(jīng)中的分布與表達(dá)強(qiáng)度變化.(二)CNTF對不同年齡大鼠坐骨神經(jīng)再生的作用.采用①TUNEL法、電鏡、流式細(xì)胞儀Annexin

2、 V/PI雙標(biāo)檢測脊髓細(xì)胞凋亡;HE、Nissl染色、乙酰膽堿酯酶(ACHE)染色檢測脊髓神經(jīng)元病變;免疫組織化學(xué)、Western blotting檢測脊髓Caspase3及Bcl-x1的分布與表達(dá)強(qiáng)度變化,并進(jìn)行Caspase3活性檢測;②辣根過氧化物酶(HRP)逆行示蹤、電鏡觀察神經(jīng)再生情況;腓腸肌ACHE組化染色檢測運(yùn)動終板ACHE活性;電刺激強(qiáng)迫運(yùn)動實(shí)驗(yàn)、神經(jīng)傳導(dǎo)速度(NCV)測定檢測神經(jīng)再生功能恢復(fù)情況.旨在研究不同年齡大鼠周