甲狀腺激素和神經(jīng)生長因子聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響.pdf

1、背景與目的:
　　 周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生和功能恢復(fù)問題一直是臨床研究的熱點(diǎn)。神經(jīng)斷裂后神經(jīng)吻合技術(shù)日臻完善，但在功能恢復(fù)方面仍然未獲得較為理想的效果，無數(shù)的科研工作者和臨床工作者前仆后繼的不懈努力尋找一種行之有效的方法。要想解決功能問題，首先要解決神經(jīng)再生問題。不可否認(rèn)的是神經(jīng)再生過程與軸突的延長和髓鞘化關(guān)系密切。而軸突延長與生長錐內(nèi)細(xì)胞骨架的重構(gòu)密切相關(guān)，細(xì)胞骨架的主要成份是微管，微絲和神經(jīng)絲蛋白。這些蛋白的含量及再生軸突的

2、髓鞘化，與再生神經(jīng)所處的微環(huán)境中的各種神經(jīng)營養(yǎng)因子、激素、雪旺細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、細(xì)胞基質(zhì)和黏附分子等密切相關(guān)。神經(jīng)生長因子為神經(jīng)再生提供營養(yǎng)支持和促進(jìn)軸突延長，臨床效果較為肯定，而甲狀腺激素一般認(rèn)為對(duì)神經(jīng)再生有一種綜合持久的促進(jìn)效應(yīng)。最近研究表明，神經(jīng)生長因子和甲狀腺激素對(duì)神經(jīng)再生過程中某些蛋白的表達(dá)有協(xié)同作用。有研究人員制作大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型時(shí)硅膠管套接神經(jīng)斷端，硅膠管內(nèi)事先注藥或?qū)嶒?yàn)中定期注藥，硅膠管在體內(nèi)是異物，一方面對(duì)神經(jīng)再生本

3、身有影響，另一方面需再次手術(shù)取出。也有人利用組織化工程神經(jīng)制作大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型。部分研究雖在實(shí)驗(yàn)中獲得良好效果，但真正可用于臨床中的寥寥無幾。因此，實(shí)驗(yàn)中選擇了最為簡單可靠有實(shí)用價(jià)值的大鼠坐骨神經(jīng)離斷后原位吻合模型。本實(shí)驗(yàn)旨在利用該模型，探討甲狀腺激素和神經(jīng)生長因子聯(lián)合應(yīng)用對(duì)周圍神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響。
　　 方法:
　　 成年健康雄性SD大鼠64只，清潔級(jí)，體重240g-260g，平均體重250±15g。大鼠稱重

4、后，用2％戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉，雙后肢外展，四肢橡皮筋固定于手術(shù)臺(tái)，剪去右髖部鼠毛，常規(guī)右后肢消毒鋪無菌洞巾，右股后部縱行切口約2 cm，鈍性分離股二頭肌和股外側(cè)肌，游離右側(cè)坐骨神經(jīng)，于梨狀肌下緣5 mm，銳性離斷坐骨神經(jīng)，手術(shù)顯微鏡下以神經(jīng)血管為解剖標(biāo)志對(duì)位，斷端對(duì)合整齊，用10-0無創(chuàng)傷縫線縫合神經(jīng)外膜4針打結(jié)松緊適度且一致，創(chuàng)面止血，0號(hào)縫合線縫合大鼠皮膚切口。隨機(jī)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為A，B，C，D共4組，每組16只并

5、按組標(biāo)記。A組（T3+NGF組）:術(shù)側(cè)腓腸肌注射T35μg/d，術(shù)側(cè)腓腸肌注射NGF0.6μg/d;B組（NGF組）:術(shù)側(cè)腓腸肌注射5μg/d的生理鹽水，術(shù)側(cè)腓腸肌注射NGF0.6μg/d;C組（T3組）:術(shù)側(cè)腓腸肌注射T35μg/d，術(shù)側(cè)腓腸肌注射0.6μg/d生理鹽水;D組（NS組）:術(shù)側(cè)腓腸肌注射5.6μ g/d生理鹽水。共注射4周。術(shù)后12周內(nèi)進(jìn)行:大體觀察、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)測定、神經(jīng)電生理測定、NF-H免疫組化染色和軸突計(jì)數(shù)、

6、Western Blotting分析NF-H蛋白含量、電鏡下觀察軸突再生情況。
　　 結(jié)果:
　　 聯(lián)合用藥組與余組相比:
　　 (1)在大體觀察中:大鼠足底潰瘍出現(xiàn)較遲愈合較好，展爪反射出現(xiàn)最早;
　　 (2)神經(jīng)再生的組織學(xué)評(píng)價(jià)中:NF-H陽性軸突數(shù)較多;NF-H含量較高，灰度對(duì)比差異顯著，P＜0.05;電鏡下軸突再生恢復(fù)較好;
　　 (3)神經(jīng)功能恢復(fù)的評(píng)價(jià)中:坐骨神經(jīng)功能指數(shù)和神經(jīng)電生理測