乙型肝炎病毒全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠的生物學(xué)特性研究.pdf

1、該課題就是利用我們實(shí)驗(yàn)室建立并優(yōu)選的乙肝全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3號(hào)"品系的F6-F17代小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,從DNA、RNA、蛋白質(zhì)、病毒學(xué)、病理學(xué)和免疫學(xué)角度,綜合研究了該品系轉(zhuǎn)基因小鼠的生物學(xué)特性,使其成為可應(yīng)用于乙型肝炎病毒相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型.本研究采用基因組DNAPCR、Southern blotting和DNA測(cè)序的方法,分析了HBV基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的整合特征,結(jié)果表明,adr亞型的

2、乙型肝炎病毒全基因組轉(zhuǎn)基因已穩(wěn)定的整合在轉(zhuǎn)基因小鼠的基因組中,并能通過(guò)生殖系以孟德爾遺傳方式在世代間穩(wěn)定遺傳.利用RT-PCR和real-time RT-PCR對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織中的總RNA進(jìn)行定性和半定量檢測(cè),分析了HBV基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的轉(zhuǎn)錄特征,結(jié)果發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因小鼠中整合的HBV基因能夠轉(zhuǎn)錄出病毒的所有mRNAs,病毒mRNA的半定量檢測(cè)可用于評(píng)價(jià)抗病毒治療的研究,是評(píng)價(jià)該轉(zhuǎn)基因小鼠的重要指標(biāo)之一.我們進(jìn)一步對(duì)該品系轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)

3、行了組織病理學(xué)、血清酶學(xué)和免疫學(xué)的檢測(cè),分析了轉(zhuǎn)基因小鼠的病理學(xué)和免疫學(xué)特征.本課題的研究表明,我們建立的乙肝轉(zhuǎn)基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3號(hào)"品系具有基因組中穩(wěn)定整合HBV基因組DNA;肝組織中有病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄、病毒蛋白的表達(dá)和病毒顆粒的包裝;病毒蛋白和病毒顆?？煞置谌胙?部分轉(zhuǎn)基因小鼠出現(xiàn)了類似于人類慢性HBV無(wú)癥狀攜帶者的肝組織病理性損傷;肝組織中浸潤(rùn)的單個(gè)核細(xì)胞為CD3<'+>、CD4<'+>T細(xì)