人誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞衍生畸胎瘤體外分化的初步研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：牮蒸支日期：人誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞衍生畸胎瘤體外分化的初步研究中文摘要人誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞衍生

2、畸胎瘤體外分化的初步研究中文摘要目的將正常人角質(zhì)形成細(xì)胞(Kc)重編程生成的誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞(iPSCs)進(jìn)行體內(nèi)畸胎瘤實驗，旨在證明其具有向多個胚層類型細(xì)胞分化的潛能。方法將iPSCs懸液注射至裸鼠體內(nèi)，觀察種植部位腫瘤生長情況。成瘤后無菌摘除瘤體，等分為二，一份行HE染色和免疫組化檢測，一份組織消化后分別用KC、M254、DMEM培養(yǎng)基體外培養(yǎng)，倒置顯微鏡和免疫熒光顯微鏡觀察，培養(yǎng)細(xì)胞行免疫化學(xué)檢測。結(jié)果接種后8周后裸鼠體內(nèi)腫瘤生長

3、至036cm3，瘤體HE染色見細(xì)胞呈團(tuán)片狀分布，核大深染，核仁明顯，胞漿豐富，大小形態(tài)較一致，核分裂易見。瘤體組織免疫組化標(biāo)記：Vimentin()，Ki一67()，CK(pan)()，Oct3／4()，GFAP(一)，AFP(一)。腫瘤組織細(xì)胞培養(yǎng)一周后，倒置顯微鏡下觀察：KC培養(yǎng)基內(nèi)細(xì)胞貼壁生長，呈多角形，排列緊密，部分立體生長。M254培養(yǎng)基內(nèi)細(xì)胞貼壁生長，呈長梭形，排列稀疏，可見樹突狀結(jié)構(gòu)。DMEM培養(yǎng)基內(nèi)細(xì)胞貼壁生長，呈梭形或