阿維菌素系列手性固定相的制備及應(yīng)用研究.pdf

1、研究和開發(fā)普適性強、柱容量高、柱性能穩(wěn)定的理想手性固定相一直是色譜工作者孜孜以求的目標(biāo)。新手性固定相的開發(fā)應(yīng)該包括以下步驟：新的手性選擇子的選擇-→固定化-→被分離物質(zhì)的篩選-→手性識別機理的研究。本論文圍繞著全新的高效液相色譜手性固定相的開發(fā)，根據(jù)上述步驟展開，完成了以下工作： 本文率先將農(nóng)用抗生素引入手性固定相合成工作當(dāng)中，首次將三種結(jié)構(gòu)相似的農(nóng)用抗生素：阿維菌素、伊維菌素和甲氨基阿維菌素鍵合到硅膠表面，制備出一系列全新的高

2、效液相色譜手性固定相，并考察了其在不同色譜模式下對對映異構(gòu)體的拆分情況，實驗結(jié)果表明，阿維菌素系列手性固定相對三唑類化合物有著較好的手性分離效果。目前這部分工作已經(jīng)申請了專利保護。 經(jīng)過優(yōu)化后的固定相制備條件為：取干燥的阿維菌素系列化合物3.0g置于250mL圓底三頸燒瓶中，加入100mL干燥吡啶，攪拌5min，然后滴加0.5mL(3-異氰酸酯基丙基)三乙氧基硅烷，氮氣保護下70℃反應(yīng)1h，冷至室溫后，加入3.0g經(jīng)酸處理活化過

3、的硅膠，氮氣保護下于70℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)12h，過濾，依次用吡啶、DMF、甲醇、水、丙酮洗滌數(shù)次，60℃真空干燥過夜。稱取上述手性固定相3.5g，以四氯化碳為勻漿液，以無水乙醇為頂替液，在60Mpa壓力下將固定相裝入不銹鋼柱(250mm×4.6mmI.D.)中即可得到阿維菌素系列高效液相色譜手性柱。 本文的另一部分首次將圓二色檢測器和基于二元檢測器的解卷積方法應(yīng)用于新手性固定相合成的后期工作當(dāng)中，成功解決了被分離物質(zhì)篩選的難題，降

4、低手性分離判斷對色譜條件的依賴性，減少了色譜條件優(yōu)化所需要的時間，大大縮短了篩選時間。在手性固定相合成的開始階段，由于合成路線、方法等的選擇不完全合理，會造成所制備的手性色譜柱柱效低，對手性化合物的分離度低；而且由于被分離對象有限及色譜條件選擇等方面的原因，分離對象在所制備的手性固定相上未必可以得到很好的分離，這時如果我們使用非手性檢測器，由于色譜峰的重疊將會很難判斷對映體是否分離，很有可能在手性固定相合成的篩選階段就將這種手性選擇子排

5、除。使用高效液相色譜圓二色檢測器將可以在很大程度上避免這種情況的發(fā)生，即使在分離因子α接近1.00的情況下，使用高效液相色譜圓二色檢測器也可以很清楚的看到對映體的分離。但是這時我們還缺少保留時間、分離因子等關(guān)鍵數(shù)據(jù)，使用解卷積方法可以使原本重疊的色譜峰分離，并得出諸如保留時間、分離因子、峰面積等的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，這樣就可以更好的評價新手性固定相的性能，進一步優(yōu)化其合成方法及色譜分離條件。 文獻報道的解卷積方法需要分步處理，然后得出解方