沙鼠前腦缺血再灌注后腦組織HSP20和iNOS的表達及HSP20動脈血清濃度的研究.pdf

1、目的： 探討在沙鼠短暫性前腦缺血再灌注模型中，HSP2O與iNOS在腦組織中表達的相關(guān)性及前者在動脈血清中的濃度變化，評估HSP20的神經(jīng)保護作用及其臨床應(yīng)用前景。 方法： 通過夾閉雙側(cè)頸總動脈10分鐘后再通的方法建立沙鼠前腦缺血再灌注模型：45只健康雄性蒙古沙鼠隨機分為正常對照組(n=5)、假手術(shù)組(SO)(n=20)和缺血再灌注組(I/R)(n=20)，后兩者分別分為6小時、1天、3天和7天四個亞組，每組5只

2、，分別在缺血再灌注或假手術(shù)后各時間點收集動脈血血清后分批處死動物，快速取腦組織制作標本，采用HE染色觀察海馬CAl區(qū)病理改變；采用免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測前腦HSP20與iNOS的表達；采用ELESA法檢測HSP20在動脈血血清中的濃度；全部數(shù)據(jù)用SPSS15.0進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果： 1.HE染色：各缺血再灌注組中海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞均較正常組及假手術(shù)組減少；隨著再灌注后時間延長，神經(jīng)元壞死增多，并伴有不同程度的膠

3、質(zhì)細胞增生，這種改變以缺血再灌注后3天和7天最為明顯。 2.免疫組化染色：正常對照組和各假手術(shù)組的腦組織無或僅見極少量的HSP20和iNOS陽性表達；缺血再灌注后二者的表達均隨損傷時間延長而上調(diào)且于第3天達到高峰，第7天可見表達下降但仍高于正常組和假手術(shù)組(p＜0.05)，各時間點比較p＜0.05。運用直線相關(guān)性分析可知二者的表達呈正相關(guān)，其Pearson相關(guān)系數(shù)為0.884，P<0.05。 3.ELESA試驗：正常組及

4、各假手術(shù)組的沙鼠動脈血清中HSP20含量極低。腦缺血再灌注后6小時HSP20的含量迅速升高至最高峰，其濃度值自第1天開始下降，第3天及第7天繼續(xù)降低但仍高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05)，不同時間點比較p<0.05。 結(jié)論： 1.HSP20在缺血再灌注腦組織中表達上調(diào)。 2.HSP20可能通過影響iNOS而發(fā)揮神經(jīng)保護作用。 3.首次在腦缺血再灌注個體的動脈血清中檢測到HSP20并發(fā)現(xiàn)其濃度-時間變化規(guī)