bFGF在轉染bcl-2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達.pdf

1、分類號R7433中國鏨升夫單位代碼：10159學號：200050016拳碩士學位論文(具有研究生畢業(yè)同等學力申請學位人員)題目：bFGF在轉染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達TheexpressionofbFGFwithbcl一2geneinjectedaftertheMCA0for2hoursinrat申請人：卜曉霞推薦人：何志義學科專業(yè)：塑絲疸堂論文課題起止時間：2004年8月一2005年8月論文完成時間：2005年8月bF

2、GF在轉染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達目的研究bFGF在轉染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達，探討轉染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的作用，及其作用機制是否與bFGF蛋白的表達有關。方法取99只體重280一3009的wistar大鼠，隨機分配到3組中，分別為MCA0組(對照組n=33)，頸內(nèi)動脈注射空質(zhì)粒組(質(zhì)粒對照組n=33)，頸內(nèi)動脈注射質(zhì)粒pD【SN介導bcl一2基因組(bcl一2組n=33)，每組再隨機分

3、成為缺血再灌注24h、48h和72h3個亞組。采用改良L0nga線栓法制備大鼠左側大腦中動脈缺血2小時模型，2小時撤出漁線，實現(xiàn)再灌注。大鼠右側肢體活動障礙，表示模型成功：缺血再灌注后3小時向左頸內(nèi)動脈分別注射空質(zhì)粒pⅨsN、質(zhì)粒重組體pⅨsN—bcl一2。注射成功的大鼠模型在缺血再灌注24h、48h和72h做如下測定并進行統(tǒng)計分析。l腦梗死體積測定：測定梗死體積的大鼠，直接斷頭、取腦，將大腦每2mm切片，采用TTC(紅四氮唑)染色，4

4、％多聚甲醛固定，梗死部分呈白色，正常部分呈紅色。再應用顯微圖像分析系統(tǒng)計算腦缺血再灌注24h、48h、72h后的梗死體積。2免疫組化測定：實驗大鼠用lO％水合氯醛腹腔注射麻醉(35彬k)，然后以生理鹽水及4％多聚甲醛經(jīng)左心窒進行心臟灌注，固定，石蠟包埋，連續(xù)冠狀切片(厚6斗m)，應用SABC法’bcl一2免疫組化測定一抗為小鼠抗人IgG，bFGF免疫組化測定一抗為小鼠抗bFGF蛋白前體，二抗為生物素化山羊抗小鼠IgG，DAB顯色劑，常規(guī)