Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 真菌性鼻-鼻竇炎(fungalrhinosinusitis，F(xiàn)RS)是鼻科臨床常見(jiàn)的一種特異性感染性疾病。近年來(lái)研究表明，F(xiàn)RS的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，約占各種慢性鼻竇炎手術(shù)治療的6％～13％。根據(jù)組織病理學(xué)特征將真菌性鼻-鼻竇炎分為四種類(lèi)型：真菌球、變應(yīng)性真菌性鼻-鼻竇炎、慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎和急性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎。各種不同類(lèi)型的真菌性鼻-鼻竇炎的臨床特征，治療原則及預(yù)后有很大的不同。因此，對(duì)真菌性鼻-鼻竇炎進(jìn)

2、行組織病理學(xué)分型分類(lèi)診斷，對(duì)于指導(dǎo)真菌性鼻-鼻竇炎的治療和改善預(yù)后，以及提高真菌性鼻-鼻竇炎的治愈率有重要意義。 真菌性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。真菌屬于條件性致病菌，缺乏角化酶，正常情況下并不能侵蝕健康、完整的黏膜而不出現(xiàn)鼻黏膜感染。因而，機(jī)體的自身免疫狀態(tài)以及鼻-鼻竇黏膜局部防御體系在真菌性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制中顯得更為重要。近年來(lái)Toll受體(Toll-likereceptors，TLR)在鼻黏膜免疫防御中的作用越來(lái)越

3、受到人們的重視。研究表明，人類(lèi)鼻-鼻竇黏膜中存在Toll樣受體的表達(dá)，參與其天然免疫防御機(jī)制，對(duì)鼻黏膜抵抗微生物感染發(fā)揮重要作用，但其在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病中的作用研究報(bào)道較少。 本研究擬對(duì)2006年3月至2007年4月我科收治的并經(jīng)病理學(xué)證實(shí)的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例的臨床資料進(jìn)行分析、分型，探討其與臨床治療及預(yù)后的關(guān)系；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptase-polymerasechainreac

4、tion，RT-PCR)技術(shù)和免疫組織化學(xué)(Immunohisto-chemistry，IHC)方法，研究Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎中的表達(dá)情況，探討Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病中的作用。 方法： 1、收集2006年3月至2007年4月本科收治的并經(jīng)病理學(xué)證實(shí)的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例，采用常規(guī)HE染色、高碘酸品紅(periodicacid-Schiff，PAS)染色和六胺銀染色三種方法，對(duì)手術(shù)標(biāo)本進(jìn)行組

5、織病理學(xué)診斷，對(duì)本組病例進(jìn)行病理學(xué)分型；總結(jié)全部病例臨床資料，術(shù)后隨訪(fǎng)6個(gè)月至2年，分析真菌性鼻-鼻竇炎病理學(xué)類(lèi)型與治療選擇及預(yù)后的關(guān)系。 2、收集2006年3月至2007年4月本科收治的手術(shù)患者組織標(biāo)本，真菌性鼻-鼻竇炎24例、慢性鼻-鼻竇炎24例和正常下鼻甲鼻黏膜15例，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-PCR)技術(shù)和免疫組織化學(xué)(Immu

6、nohisto-chemistry，IHC)方法分別檢測(cè)三組鼻黏膜中TLR2和TLR4mRNA和蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1、本組24例真菌性鼻-鼻竇炎病理學(xué)分類(lèi)中，侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎5例(慢性侵襲型)，非侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎19例(真菌球)。本組病例致病菌明確為曲霉菌者21例；術(shù)后經(jīng)6個(gè)月至2年隨訪(fǎng)，治愈20例，復(fù)發(fā)4例。復(fù)發(fā)病例中慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎3例(60％)，非侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎復(fù)發(fā)1例(5.6

7、％)。復(fù)發(fā)4例經(jīng)再次上頜竇根治術(shù)或鼻內(nèi)鏡輔助下上頜竇根治術(shù)后治愈。 2、RT-PCR結(jié)果顯示TLR2和TLR4mRNA在真菌性鼻-鼻竇炎、慢性鼻-鼻竇炎和正常下鼻甲鼻黏膜組織中均有表達(dá)，真菌性鼻-鼻竇炎組織中的表達(dá)水平(0.208±0.063；0.159±0.059)明顯低于慢性鼻-鼻竇炎(0.505±0.097；0.406±0.102)和正常下鼻甲組織(0.327±0.047；0.232±0.088)，且每?jī)山M間差異均具有統(tǒng)計(jì)

8、學(xué)意義(P值均小于0.05)。免疫組織化學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)在真菌性鼻-鼻竇炎組織中TLR2和TLR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為12.5％(3/24)、16.7％(4/24)，明顯低于慢性鼻-鼻竇炎組織的83.3％(20/24)、87.5％(21/24)和正常下鼻甲組織的46.7％(7/15)、53.3％(8/15)，每?jī)山M間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.05). 結(jié)論： 1、本組收集的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例的病理學(xué)類(lèi)型以真菌

9、球?yàn)橹?，慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎次之；真菌特異性染色可以作為慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎診斷和鑒別診斷的主要依據(jù)；在真菌性鼻-鼻竇炎病理診斷中以曲霉菌感染為主。真菌性鼻-鼻竇炎病理學(xué)分類(lèi)對(duì)真菌性鼻-鼻竇炎治療選擇和預(yù)后有很重要的指導(dǎo)意義。 2、TLR2和TLR4在正常鼻黏膜組織中表達(dá)，且在慢性鼻-鼻竇炎鼻黏膜中表達(dá)上調(diào)，表明鼻黏膜上皮具備TLR參與的局部正常防御系統(tǒng)；在鼻-鼻竇炎癥過(guò)程中，炎癥刺激能上調(diào)TLR在鼻黏膜組織中的表達(dá)

10、，表明TLR可能啟動(dòng)和參與了鼻-鼻竇的一系列的免疫防御性炎癥反應(yīng)，構(gòu)成抵御多種病原微生物入侵的第一道防線(xiàn)。 3、本研究首次檢測(cè)了TLR2和TLR4mRNA和蛋白在真菌性鼻-鼻竇炎鼻黏膜組織中的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TLR2和TLR4在真菌性鼻-鼻竇炎中表達(dá)下調(diào)，與正常對(duì)照組及慢性鼻-鼻竇炎組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表明其在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病個(gè)體，存在鼻竇黏膜組織TLRs及其介導(dǎo)的天然免疫作用下降，可能是引起鼻黏膜真菌清除率下降和真菌