Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎中的表達及意義.pdf

1、目的： 真菌性鼻-鼻竇炎(fungalrhinosinusitis，F(xiàn)RS)是鼻科臨床常見的一種特異性感染性疾病。近年來研究表明，F(xiàn)RS的發(fā)病率呈上升趨勢，約占各種慢性鼻竇炎手術治療的6％～13％。根據組織病理學特征將真菌性鼻-鼻竇炎分為四種類型：真菌球、變應性真菌性鼻-鼻竇炎、慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎和急性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎。各種不同類型的真菌性鼻-鼻竇炎的臨床特征，治療原則及預后有很大的不同。因此，對真菌性鼻-鼻竇炎進

2、行組織病理學分型分類診斷，對于指導真菌性鼻-鼻竇炎的治療和改善預后，以及提高真菌性鼻-鼻竇炎的治愈率有重要意義。 真菌性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機制仍不清楚。真菌屬于條件性致病菌，缺乏角化酶，正常情況下并不能侵蝕健康、完整的黏膜而不出現(xiàn)鼻黏膜感染。因而，機體的自身免疫狀態(tài)以及鼻-鼻竇黏膜局部防御體系在真菌性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機制中顯得更為重要。近年來Toll受體(Toll-likereceptors，TLR)在鼻黏膜免疫防御中的作用越來越

3、受到人們的重視。研究表明，人類鼻-鼻竇黏膜中存在Toll樣受體的表達，參與其天然免疫防御機制，對鼻黏膜抵抗微生物感染發(fā)揮重要作用，但其在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病中的作用研究報道較少。 本研究擬對2006年3月至2007年4月我科收治的并經病理學證實的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例的臨床資料進行分析、分型，探討其與臨床治療及預后的關系；采用逆轉錄聚合酶鏈反應(reversetranscriptase-polymerasechainreac

4、tion，RT-PCR)技術和免疫組織化學(Immunohisto-chemistry，IHC)方法，研究Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎中的表達情況，探討Toll樣受體在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病中的作用。 方法： 1、收集2006年3月至2007年4月本科收治的并經病理學證實的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例，采用常規(guī)HE染色、高碘酸品紅(periodicacid-Schiff，PAS)染色和六胺銀染色三種方法，對手術標本進行組

5、織病理學診斷，對本組病例進行病理學分型；總結全部病例臨床資料，術后隨訪6個月至2年，分析真菌性鼻-鼻竇炎病理學類型與治療選擇及預后的關系。 2、收集2006年3月至2007年4月本科收治的手術患者組織標本，真菌性鼻-鼻竇炎24例、慢性鼻-鼻竇炎24例和正常下鼻甲鼻黏膜15例，采用逆轉錄-聚合酶鏈反應(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-PCR)技術和免疫組織化學(Immu

6、nohisto-chemistry，IHC)方法分別檢測三組鼻黏膜中TLR2和TLR4mRNA和蛋白的表達水平。 結果： 1、本組24例真菌性鼻-鼻竇炎病理學分類中，侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎5例(慢性侵襲型)，非侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎19例(真菌球)。本組病例致病菌明確為曲霉菌者21例；術后經6個月至2年隨訪，治愈20例，復發(fā)4例。復發(fā)病例中慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎3例(60％)，非侵襲型真菌性鼻-鼻竇炎復發(fā)1例(5.6

7、％)。復發(fā)4例經再次上頜竇根治術或鼻內鏡輔助下上頜竇根治術后治愈。 2、RT-PCR結果顯示TLR2和TLR4mRNA在真菌性鼻-鼻竇炎、慢性鼻-鼻竇炎和正常下鼻甲鼻黏膜組織中均有表達，真菌性鼻-鼻竇炎組織中的表達水平(0.208±0.063；0.159±0.059)明顯低于慢性鼻-鼻竇炎(0.505±0.097；0.406±0.102)和正常下鼻甲組織(0.327±0.047；0.232±0.088)，且每兩組間差異均具有統(tǒng)計

8、學意義(P值均小于0.05)。免疫組織化學檢查發(fā)現(xiàn)在真菌性鼻-鼻竇炎組織中TLR2和TLR4蛋白的陽性表達率分別為12.5％(3/24)、16.7％(4/24)，明顯低于慢性鼻-鼻竇炎組織的83.3％(20/24)、87.5％(21/24)和正常下鼻甲組織的46.7％(7/15)、53.3％(8/15)，每兩組間差異均有統(tǒng)計學意義(P值均小于0.05). 結論： 1、本組收集的24例真菌性鼻-鼻竇炎病例的病理學類型以真菌

9、球為主，慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎次之；真菌特異性染色可以作為慢性侵襲性真菌性鼻-鼻竇炎診斷和鑒別診斷的主要依據；在真菌性鼻-鼻竇炎病理診斷中以曲霉菌感染為主。真菌性鼻-鼻竇炎病理學分類對真菌性鼻-鼻竇炎治療選擇和預后有很重要的指導意義。 2、TLR2和TLR4在正常鼻黏膜組織中表達，且在慢性鼻-鼻竇炎鼻黏膜中表達上調，表明鼻黏膜上皮具備TLR參與的局部正常防御系統(tǒng)；在鼻-鼻竇炎癥過程中，炎癥刺激能上調TLR在鼻黏膜組織中的表達

10、，表明TLR可能啟動和參與了鼻-鼻竇的一系列的免疫防御性炎癥反應，構成抵御多種病原微生物入侵的第一道防線。 3、本研究首次檢測了TLR2和TLR4mRNA和蛋白在真菌性鼻-鼻竇炎鼻黏膜組織中的表達水平，結果發(fā)現(xiàn)TLR2和TLR4在真菌性鼻-鼻竇炎中表達下調，與正常對照組及慢性鼻-鼻竇炎組比較差異有統(tǒng)計學意義；表明其在真菌性鼻-鼻竇炎發(fā)病個體，存在鼻竇黏膜組織TLRs及其介導的天然免疫作用下降，可能是引起鼻黏膜真菌清除率下降和真菌