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1、 目的:本實驗以去除卵巢制作小鼠骨質(zhì)疏松癥模型,通過免疫組織化學染色測定骨組織中NF-KBP65及IL-6的蛋白含量及表達水平并進行細胞定位,探討骨微環(huán)境中核因子及相關(guān)細胞因子與骨質(zhì)疏松癥發(fā)病過程中的關(guān)系及意義?! 》椒ǎ?.4月齡同批成年雌性balb/c小鼠20只,體重19~21g,隨機分兩組。2.于去勢后3個月各取實驗組和對照組balb/c小鼠各10只,置于DPX-L型Lunar雙光子骨密儀上通過計算機系統(tǒng)中心動物軟件測量每只小
2、鼠全身骨密度(BMD)。3.動物處死后,立即無菌操作取左側(cè)股骨下段,迅速放入新鮮配制的4﹪多聚甲醛固定液中,免疫組織化學染色及觀察。隨機引物法標記探針,采用地高辛標記的NF-KBP65cDNA探針作為原位雜交檢測其mRNA的探針。4.結(jié)果判定與圖像分析統(tǒng)計學分析小鼠全身骨密度、核因子NF-KBP65和IL-6蛋白含量表達用均數(shù)±標準差(-x±s)表示,進行t檢驗和相關(guān)性分析?! 〗Y(jié)論:骨質(zhì)疏松骨組織中核因子和IL-6表達增高,骨密度有
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