去勢大鼠骨髓源細胞與骨質(zhì)疏松相關(guān)基因表達及骨組織學(xué)變化觀察的實驗研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松是一種老年性常見病，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松(PMO)的發(fā)生主要與增齡所致的體內(nèi)性激素突然減少及生理性退變有關(guān)。雌激素缺乏是導(dǎo)致骨吸收亢進的主要原因。骨髓微環(huán)境中某些細胞因子如白細胞介素6(IL-6)水平升高在雌激素缺乏所致骨丟失中起著重要作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，葛根素是一種分離得到的異黃酮類植物提取物，具有與雌激素相類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，具有雌激素樣活性，有明顯的抗骨質(zhì)疏松作用，但對其作用機制尚不清楚。本實驗觀察大鼠去卵巢后不同時期骨髓細胞

2、IL-6基因表達水平和骨組織學(xué)的變化，從骨髓細胞中提取RNA，采用相對半定量逆轉(zhuǎn)錄2聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)，研究雌激素和葛根素對去卵巢(ovariectomized，OVX)大鼠IL-6mRNA表達水平的影響，探討IL-6在PMO發(fā)病中的作用及葛根素對PMO的治療機理。 實驗1去勢大鼠骨髓細胞IL-6基因表達及骨組織學(xué)變化觀察的實驗研究取健康3月齡雌性SD大鼠48只，分為去勢組和假手組，每組24只。分別于去卵巢后4、6

3、、8、12周取去勢組和對照組各6只大鼠骨髓細胞提取RNA(左側(cè)股骨)。PCR方法檢測IL-6基因表達和骨組織學(xué)(右側(cè)股骨)觀察。結(jié)果表明，術(shù)后4周，實驗組骨髓細胞IL-6基因均呈弱表達，6周呈強表達，8、12周表達水平較峰值下降，但仍高于對照組。去勢后對照組各時間段IL-6基因表達水平未見變化。術(shù)后4、6、8周實驗組骨組織學(xué)未見明顯變化；12周骨髓腔擴大，骨皮質(zhì)變薄，骨小梁變細，見斷裂：實驗結(jié)果表明，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的發(fā)生與IL-6基因水

4、平增強有一定的關(guān)系。 實驗2葛根素對去勢大鼠血清E2、腰椎BMD及白細胞介素6(IL-6)mRNA表達的影響取48只健康3月齡雌性SD大鼠，隨機分成假手術(shù)組、去卵巢(OVX)組、尼爾雌醇組和葛根素組，每組12只。假手術(shù)組進行假手術(shù)，其余各組通過切除雙側(cè)卵巢，術(shù)后分別給與尼爾雌醇和葛根素治療。3個月后測量腰椎骨密度(BMD)，然后處死各組動物，從骨髓細胞中提取總RNA，采用相對半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測IL-6mRNA表達