Hsp70、Hsf-1與急性缺血性腦卒中預(yù)后及大動脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的研究.pdf

1、[背景與目的] 急性缺血性腦卒中是目前人類發(fā)病率、致殘率、死亡率最高的疾病之一，嚴(yán)重危害人類健康。它是一組多病因/發(fā)病機制的異質(zhì)性疾病，不同的缺血性卒中亞型在病因和病理生理機制方面存在著一定的差異，其病情嚴(yán)重程度和預(yù)后也不同。TOAST分型是目前應(yīng)用最廣泛的病因?qū)W分型方法，但其確定需待多項輔助檢查完善，具有一定的“遲滯性”，尋找一種有效的生物學(xué)指標(biāo)協(xié)助臨床的早期判別病因?qū)W分型具有重要的現(xiàn)實意義。大動脈粥樣硬化性卒中(LAA)是T

2、OAST分型中重要的一型，動脈粥樣硬化斑塊形成及脫落是LAA的主要發(fā)病機制，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)熱休克蛋白70(Heat shock protein70，Hsp70)其上游調(diào)控?zé)嵝菘艘蜃?Heat shock factor-1，Hsf-1)不僅與缺血性損傷的嚴(yán)重程度有關(guān)，并且與動脈粥樣硬化也可能存在一定的相關(guān)性。其在缺血性卒中后神經(jīng)功能缺損及動脈粥樣硬化形成過程中究竟是功是過，目前尚未有明確的定論，現(xiàn)今基于此問題的研究大多是集中在基礎(chǔ)實驗研究領(lǐng)域，

3、而臨床及流行病學(xué)調(diào)查研究認(rèn)識不足。為進一步發(fā)掘其在人體水平上與病理情況的相關(guān)關(guān)系，本研究的目的在于：探討熱休克蛋白三個不同水平：Hsf-1 mRNA、胞內(nèi)Hsp70蛋白、血漿可溶性Hsp70蛋白(sHsp70)在急性缺血性腦卒中患者中的動態(tài)變化，與神經(jīng)功能缺損評分及預(yù)后的相關(guān)性，以及其在不同病因?qū)W分型之間的差異。以期發(fā)現(xiàn)可用于早期評估缺血性卒中患者預(yù)后及病因?qū)W分型的可能的生物學(xué)指標(biāo)，為早期制定預(yù)防和治療策略提供依據(jù)。 [方法]

4、 收集2008年2月至2008年10月在我院神經(jīng)內(nèi)科和急診科就診的首次發(fā)病的急性腦梗死患者及年齡、性別相匹配的同期體檢者40例作對照。通過逆轉(zhuǎn)錄PCR擴增檢測PBMC中Hsf-1 mRNA水平，Western Blotting方法檢測胞內(nèi)誘導(dǎo)型Hsp70蛋白，同時用ELISA方法檢測胞外血漿中的可溶性Hsp70蛋白。其中32例患者動態(tài)檢測4個時間點(發(fā)病24小時內(nèi)、第3、7天及第14天)Hsf-1 mRNA及sHsp70蛋白表達(dá)。

5、記錄患者的一般資料及合并危險因素情況，入選患者于入院24小時內(nèi)采用美國國立衛(wèi)生院神經(jīng)功能缺損評分(NIHSS)評價神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度，發(fā)病3月時以mRS(改良Rankin量表)測定患者日常生活活動的依賴和病殘程度，評估病情轉(zhuǎn)歸，頸動脈彩超檢測病變側(cè)頸動脈的內(nèi)—中膜厚度(IMT)、斑塊性質(zhì)和狹窄程度，所有數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計分析。 [結(jié)果] 1.符合標(biāo)準(zhǔn)的腦梗塞患者156例，其中大動脈粥樣硬化性卒中(LAA)占25

6、.64％，小動脈閉塞性卒中(SAO)占21.15％，不明原因的腦卒中(SUE)占31.41％0。 2.對照組年齡與Hsf-1 mRNA的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=—0.486，P=0.001)；控制Hsf-1的表達(dá)因素后，年齡與Hsp70之間不存在相關(guān)關(guān)系(r編=—0.013，P＝0.940)；病例組在控制年齡因素后，Hsf-1 mRNA與Hsp70表達(dá)之間存在正相關(guān)關(guān)系(r編=0.874，P<0.001)，與胞外sHsp70無相關(guān)

7、關(guān)系。 3.動態(tài)觀察32例患者Hsf-1 mRNA及sHsp70表達(dá)的動態(tài)變化，二者表達(dá)在發(fā)病24小時內(nèi)達(dá)即達(dá)高峰，至卒中起病后第7天時表達(dá)降至正常水平(P＝—0.132，P=0.692)。 4.神經(jīng)功能缺損輕型組Hsf-1 mRNA及Hsp70的表達(dá)高于重型組(P＝0.006，P＝0.029)，ESR和Hs—CRP的表達(dá)重型組高于輕型組。發(fā)病24小時內(nèi)NIHSS評分是預(yù)后不良獨立的危險因素(OR=1.373，95％CI

8、1.061-1.777)。 5.Hsf-1 mRNA、Hsp70、sHsp70的表達(dá)高于對照組，且LAA組高于SAO組。Hsf-1 mRNA、sHsp70不是LAA分型獨立的預(yù)測因素。 6.隨訪68例患者，預(yù)后良好組Hsf-1 mRNA的表達(dá)高于預(yù)后不良組(P=0.035)，經(jīng)二分類Logistic回歸分析可見Hsf-1 mRNA表達(dá)降低是預(yù)后不良獨立的危險因素(OR=0.216，95％CI0.179-0.351)，而H

9、sp70未進入回歸方程。 7.軟斑或混合斑組sHsp70的表達(dá)高于硬斑組或無斑塊形成組，斑塊形成組或管腔狹窄組sHsp70的表達(dá)內(nèi)膜增厚組或正常組(P<0.05)，重度狹窄>70％及閉塞組的Hsf-1 mRNA和Hsp70的表達(dá)高于其它組(P<0.05)。 [結(jié)論] 1.對急性缺血性卒中按TOAST方法進行病因?qū)W分型，其中原因不明型所占的比例最高(31.41％)，在確定缺血性卒中病因?qū)W分型時有待深入檢查和長期隨訪

10、： 2.年齡與Hsf-1 mRNA的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)； 3.從人體水平上進一步證實Hsf-1是一個缺血后上調(diào)的基因，其轉(zhuǎn)錄水平與胞內(nèi)Hsp70的表達(dá)水平有關(guān)，與胞外sHsp70表達(dá)無關(guān)。胞內(nèi)Hsp70與胞外sHsp70的產(chǎn)生機制可能不同，因而有不同的病理生理學(xué)效應(yīng)； 4.Hsf-1 mRNA表達(dá)與ESR、Hs—CRP一樣，可能是反映神經(jīng)功能缺損程度及預(yù)后的敏感指標(biāo)。Hsf-1 mRNA表達(dá)下降是預(yù)后不良獨立的危險