硫酸奈替米星葡萄糖注射液質(zhì)量研究.pdf

1、硫酸奈替米星為一新的半合成的氨基糖苷類廣譜抗生素，具有廣泛的抗微生物作用，主要針對革蘭陰性桿菌屬和少數(shù)革蘭陽性菌。硫酸奈替米星葡萄糖注射液有較高的生物利用度，毒性小，耐受性好，臨床療效高，在防治細(xì)菌感染方面，具有較好的治療作用。
　　 由于硫酸奈替米星易溶于水，對熱不穩(wěn)定，注射劑制備和貯存過程中易變色、有關(guān)物質(zhì)增加，容易造成異常毒性不合格，在臨床應(yīng)用上，容易引起過敏反應(yīng)，造成用藥的不安全性。
　　 而硫酸奈替米星葡萄糖注

2、射液現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)的檢查是采用薄層色譜法對其控制，但是由于葡萄糖濃度大，奈替米星主斑點(diǎn)無法和葡萄糖的斑點(diǎn)分離，雜質(zhì)斑點(diǎn)更無法檢出，所以用薄層色譜法對其有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測，結(jié)果很不理想。硫酸奈替米星的含量測定國內(nèi)外藥典均采用抗生素微生物檢定法測定，操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，也是由于葡萄糖的濃度較高，在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)葡萄糖對硫酸奈替米星的效價(jià)測定產(chǎn)生影響，致使重現(xiàn)性較差，并且效價(jià)法的結(jié)果是該藥物主成分與其有關(guān)物質(zhì)抑菌力的總和，測定結(jié)果不能反映藥物主成分

3、的真實(shí)含量。由于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的缺陷，難以反映產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量。
　　 由于奈替米星等氨基糖苷類結(jié)構(gòu)中缺少強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，較難應(yīng)用常規(guī)的HPLC-UV法檢測，文獻(xiàn)報(bào)道也多為柱前或柱后衍生化的HPLC-UV法，用衍生化的技術(shù)雖然可以解決質(zhì)量分析中的難題，但是由于衍生化反應(yīng)操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響因素比較多，而且衍生化反應(yīng)比較復(fù)雜，反應(yīng)過程中可能會(huì)產(chǎn)生一些副反應(yīng)，無法成功地用于該類藥物的有關(guān)物質(zhì)分析?！吨袊幍洹?010版二部中規(guī)定

4、硫酸奈替米星原料及硫酸奈替米星注射液的有關(guān)物質(zhì)測定是用高效液相色譜法-蒸發(fā)光散射檢測器(HPLC-ELSD)方法檢測，但這種方法由于靈敏度的問題只能檢測出2個(gè)主要的雜質(zhì)，本文通過改善流動(dòng)相的種類及色譜柱的選擇等色譜條件，最終選擇了0.2mol/L三氟醋酸—丙酮(86(∶)14)為流動(dòng)相，選擇了pH值較寬(pH值范圍是1.0-9.0)的UltimateLP-C18(Ⅱ)色譜柱;分析結(jié)果重現(xiàn)性極好，主峰、雜質(zhì)峰與輔料峰能夠充分分離，能夠檢測

5、出至少3個(gè)雜質(zhì)。
　　 本文通過對硫酸奈替米星葡萄糖注射液的有關(guān)物質(zhì)及含量測定方法進(jìn)行研究，建立合理的檢測方法即HPLC-ELSD法測定有關(guān)物質(zhì)和含量;通過破壞性試驗(yàn)得出結(jié)論，奈替米星在強(qiáng)光照射下穩(wěn)定，在高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及氧化破壞條件下，有分解產(chǎn)物產(chǎn)生，高溫、氧氣以及注射液的pH值是引起奈替米星降解的主要影響因素。
　　 硫酸奈替米星是由西索米星經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾而成的半合成氨基糖苷類抗生素，合成步驟包括“乙?；?、三甲基硅烷化、

6、然后再無水條件下經(jīng)亞胺、還原、水解、分離、純化等”，由于該類物質(zhì)化合物結(jié)構(gòu)中含有1個(gè)或多個(gè)羥基伯胺或仲胺基團(tuán)，顯弱堿性，在質(zhì)譜上具有較強(qiáng)的正離子響應(yīng)，因此本文通過采用高效液相色譜-電噴霧離子阱質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MSn)的方法，硫酸奈替米星原料中能檢出9個(gè)有關(guān)物質(zhì)，推定出其中7個(gè)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，分別為1-N-乙基-加洛糖胺、去甲基西索米星、西索米星、5-O-乙基奈替米星、3-N-丙基-依替米星、2'-N-乙基奈替米星，解析了其他2個(gè)物質(zhì)的部

7、分結(jié)構(gòu)。由奈替米星合成工藝可以推斷，以上有關(guān)物質(zhì)中西索米星及去甲基西索米星為起始原料帶入，5-O-乙基奈替米星、2'-N-乙基奈替米星、3"-N-乙基奈替米星為乙酰化的副產(chǎn)物，3-N-丙基-依替米星應(yīng)該是起始原料的乙?；母碑a(chǎn)物。其他2個(gè)物質(zhì)的部分結(jié)構(gòu)，要想進(jìn)行結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確鑒定還需要借助其他的手段如高分辨的多級(jí)質(zhì)譜。注射劑中除檢出上述9個(gè)雜質(zhì)，還有兩個(gè)降解產(chǎn)物，雜質(zhì)1、雜質(zhì)2（1-N-乙基-加洛糖胺）、雜質(zhì)5為硫酸奈替米星葡萄糖注射液的三