馬鈴薯早疫病菌(Alternaria solani)準性生殖現(xiàn)象的分析.pdf

1、近年來，由茄鏈格孢(Alternaria solani)引起的馬鈴薯早疫病已上升為馬鈴薯上的第二大葉部病害，了解其生殖方式對研究其生存與進化有至關(guān)重要的意義。本文對茄鏈格孢菌進行繼代培養(yǎng)，通過細胞學(xué)觀察、形態(tài)學(xué)分析、SSR分子檢測和群體遺傳多樣性分析等方法相結(jié)合，對其是否具有準性生殖進行了研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1.馬鈴薯早疫病菌的細胞學(xué)現(xiàn)象觀察:通過比較刮取菌絲、涂抹培養(yǎng)基培養(yǎng)菌絲以及插片法三種收集菌絲的方法，確立了插片法

2、作為細胞學(xué)觀察中收集菌絲的方法。建立了DAPI染液和Calcoflour White Stain染液的雙重熒光染色體系。對早疫病菌菌絲進行染色過程中發(fā)現(xiàn)了大量的菌絲融合及細胞核融合現(xiàn)象，為茄鏈格孢具有準性生殖提供了細胞學(xué)方面的證據(jù)。
　　2.繼代培養(yǎng)菌株形態(tài)學(xué)性狀:對繼代培養(yǎng)菌株的菌落形態(tài)、直徑和產(chǎn)孢量統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，親代、F1代、F2代菌株直徑和產(chǎn)孢量均呈下降趨勢，且產(chǎn)孢量與菌落顏色深淺有相關(guān)性，菌落顏色較深的菌株分生孢子量多于菌落顏

3、色淺的菌株。隨著繼代培養(yǎng)，角變現(xiàn)象呈上升趨勢，親本、F1代、F2代菌株出現(xiàn)角變現(xiàn)象的概率分別為33.33％、23.33％、52.50％。
　　3.馬鈴薯早疫病菌繼代培養(yǎng)過程中染色體丟失現(xiàn)象:采用7對SSR引物對6株早疫病菌株及其繼代培養(yǎng)菌株進行SSR檢測。7對引物中，只在As-95236位點出現(xiàn)了染色體丟失現(xiàn)象。在親代菌株中，引物As-95236檢測到在該基因位點只有一株早疫病菌HB-6為單個等位基因，另外5株菌株為兩個等位基因。

4、在60株F1代菌株中，引物As-95236檢測到在該位點存在染色體丟失現(xiàn)象的菌株共19株，占F1代菌株的31.67％。在40株F2代早疫病菌株中，引物As-95236檢測到在該基因位點存在染色體丟失現(xiàn)象的菌株共30株，占F2代菌株的75％。在As-95236位點上，F(xiàn)1代和F2代存在染色體丟失現(xiàn)象的概率分別為31.67％、75％，染色體丟失率呈上升趨勢。
　　4.茄鏈格孢菌原生質(zhì)體的制備:用酶解法對茄鏈格孢菌原生質(zhì)體制備條件進行了