灰樹花多糖及其硫酸化衍生物的結構鑒定和生物活性研究.pdf

1、灰樹花（Grifola frondosa）是一種珍貴的食藥兼用菌,多糖成分是其主要的生理活性物質。研究表明,灰樹花多糖具有抗腫瘤、免疫調節(jié)、降血糖等多種功效,而要確定這些藥理作用的物質基礎,就必須分離出均一的多糖組分。由于多糖類物質結構復雜,難于純化,因此對灰樹花多糖藥理作用的研究大都停留在粗多糖水平上,從而制約了對灰樹花資源的開發(fā)和利用。國內外對灰樹花多糖組分的分離純化研究亦有報道,但充分純化的不多,且大多數(shù)都針對的是灰樹花堿提組分。

2、
　　本文對灰樹花高濃縮精粉的熱水提取物進行分離和純化,并對所得的多糖均一組分進行初步的化學結構研究。為了進一步開發(fā)灰樹花多糖的藥用價值,本文還對所得的均一多糖進行硫酸化修飾并對其結構作初步的分析。同時,對灰樹花多糖及其硫酸化衍生物進行生物活性測定。灰樹花高濃縮精粉經熱水提取獲得水溶性灰樹花粗多糖GFP。GFP依次經DEAE-cellulose陰離子交換樹脂及Sephadex G-100葡聚糖凝膠分離純化得到GFP1-F、GFP1

3、-M及GFP1-L三種不含蛋白質的葡聚糖純品,其分子量依次為1.09×105Da、1.93×104Da和2.76×103Da。甲基化結果顯示這三種均一多糖所含的糖苷鍵類型相同,為1,4-,1,3-及1,6-糖苷鍵,分支點為1,3,6-連接葡萄糖。
　　采用吡啶-氯磺酸法對其進行硫酸化修飾,硫酸化衍生物GFP1-FS、GFP1-MS及GFP1-LS的紅外光譜分析表明,三個樣品均在1236.90cm-1和811.81cm-1有硫酸酯鍵

4、的特征吸收峰,13C NMR證明C-6上的羥基被酯化。并且GFP1-FS的硫酸化程度最高,其DS為1.07;GFP1-MS與GFP1-LS的硫酸化程度相當,DS分別為0.66和0.61。MTT結果顯示只有GFP1-MS對A549細胞的生長具有較顯著的抑制作用。與阿霉素的協(xié)同實驗結果顯示GFP1-FS、GFP1-MS及GFP1-LS與0.2μg/mL阿霉素聯(lián)用后,能明顯提高療效,其中200μg/mL GFP1-MS與阿霉素的協(xié)同效果最好,