基于P物質(zhì)和降鈣素基因相關(guān)肽的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)小鼠同種異體皮膚移植物存活影響的研究.pdf

1、腎臟移植是治療終末期腎臟疾病的最有效手段之一，但到目前為止，仍有一些問(wèn)題制約著腎移植的發(fā)展，現(xiàn)有免疫抑制藥物會(huì)帶來(lái)的各種不良反應(yīng)和副作用，移植患者容易發(fā)生各種感染;免疫移植藥物代謝的個(gè)體差異直接影響到臨床藥物劑量的調(diào)整，有部分患者的治療窗非常狹窄，在發(fā)生嚴(yán)重感染的同時(shí)合并排斥反應(yīng)。
　　鈣調(diào)神經(jīng)蛋白抑制劑（calcineurin inhibitors，CNIs）類(lèi)藥物是器官移植術(shù)后免疫抑制方案的基石，但其有自身的缺點(diǎn)，CNIs類(lèi)藥

2、物引起的慢性腎臟毒性是導(dǎo)致移植物遠(yuǎn)期存活率下降的主要原因之一。針對(duì)上述制約器官移植發(fā)展的問(wèn)題，基礎(chǔ)研究者和臨床工作者在進(jìn)行大量的探索，試圖找到更為理想的解決方案。本研究將探索神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段在同種異體移植當(dāng)中的作用。
　　神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)密不可分。在神經(jīng)原性炎癥中，P物質(zhì)(substance P，SP)和降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)是神經(jīng)纖維末梢最初釋放的神經(jīng)肽類(lèi)物

3、質(zhì)，也是最重要的肽類(lèi)物質(zhì)，均可誘發(fā)神經(jīng)性炎癥反應(yīng)，神經(jīng)原性炎癥以神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)為基礎(chǔ)，通過(guò)軸突反射和背根反射擴(kuò)大作用范圍，在神經(jīng)原性炎癥中，SP和CGRP表現(xiàn)為協(xié)同作用。
　　免疫細(xì)胞表面表達(dá)特異性的神經(jīng)肽類(lèi)物質(zhì)受體，神經(jīng)肽能夠與其結(jié)合，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，但SP和CGRP所表現(xiàn)出來(lái)的免疫學(xué)效應(yīng)卻截然相反:SP刺激T細(xì)胞增殖，CGRP抑制T細(xì)胞活化。
　　由于神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)具有廣泛分布的特點(diǎn)，神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)具有迅速使大量免疫細(xì)胞的狀態(tài)得到

4、同化的潛能。而不同神經(jīng)肽具有相反免疫學(xué)效應(yīng)的特點(diǎn)提示基于神經(jīng)免疫水平的調(diào)節(jié)可能是移植免疫中一個(gè)重要的調(diào)節(jié)點(diǎn)。基于神經(jīng)水平的免疫調(diào)節(jié)由于間接作用于免疫器官和免疫細(xì)胞，可能具有傳統(tǒng)免疫調(diào)節(jié)方法所不具備的特殊優(yōu)點(diǎn)。但這種調(diào)節(jié)方法是否具有足夠強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)能力，能否有效預(yù)防移植物的排斥反應(yīng)還沒(méi)有相關(guān)研究。本研究通過(guò)建立小鼠同種異基因皮膚移植模型，研究神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)皮膚移植物的存活、Th1和Th2細(xì)胞亞群平衡、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)和T淋巴細(xì)胞

5、各活化通路關(guān)鍵信號(hào)分子的影響，初步探索神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)在同種異基因組織移植中所占的地位和作用。
　　第一章小鼠同種異基因皮膚移植模型的建立
　　目的:成功建立小鼠同種異基因皮膚移植模型。
　　方法:分別對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行自體皮膚移植和異基因皮膚移植，皮膚移植采用全厚皮片移植，觀察并記錄移植皮片的存活情況。
　　結(jié)果:異基因皮膚移植小鼠術(shù)后4天，皮面光滑，開(kāi)始轉(zhuǎn)紅，無(wú)浮動(dòng)現(xiàn)象，7天時(shí)皮膚迅速出現(xiàn)排斥反應(yīng)，皮膚皺縮、

6、僵硬，呈干性壞死，出現(xiàn)黑痂狀。自體皮膚移植小鼠術(shù)后6天，皮面光滑，開(kāi)始轉(zhuǎn)紅，無(wú)浮動(dòng)現(xiàn)象，打包固定期間，皮片未收縮，12天時(shí)全部皮片均已愈合牢固，柔韌性好，并開(kāi)始長(zhǎng)出皮毛。拆線(xiàn)后，皮片開(kāi)始收縮，術(shù)后25天的收縮率達(dá)40-50％，以后未再繼續(xù)收縮。
　　結(jié)論: 小鼠同種異基因全厚皮片移植模型建立成功; 該模型是研究排斥反應(yīng)和相應(yīng)干預(yù)手段的理想動(dòng)物模型;任何外科手術(shù)都會(huì)誘發(fā)不同程度的神經(jīng)原性炎癥，該動(dòng)物模型是研究神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)的良好載體。

7、
　　第二章神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)同種異基因皮膚移植小鼠皮膚移植物存活的影響
　　目的:利用成功建立的小鼠皮膚移植模型，對(duì)接受皮膚移植的小鼠使用不同的神經(jīng)肽受體拮抗劑進(jìn)行干預(yù)，觀察并比較各組皮膚移植物的存活時(shí)間。
　　方法:對(duì)接受自體皮膚移植和異體皮膚移植的小鼠進(jìn)行分組，分別施加生理鹽水、SP受體拮抗劑Spantide、CGRP受體拮抗劑BIBN4096BS以及Spantide+BIBN4096BS干預(yù)，比較各組小鼠皮膚移植物

8、的存活時(shí)間，皮膚移植物存活時(shí)間的組間比較采用Kaplan-Meier法。
　　結(jié)果:觀察時(shí)間為25天，自體皮膚移植小鼠的皮膚移植物平均存活25天;異基因皮膚移植注射生理鹽水的對(duì)照組小鼠皮膚移植物平均存活時(shí)間為7天;異基因皮膚移植注射SP受體拮抗劑Spantide的小鼠皮膚移植物平均存活時(shí)間為13天;異基因皮膚移植注射CGRP受體拮抗劑BIBN4096BS的小鼠皮膚移植物平均存活時(shí)間為12天;異基因皮膚移植同時(shí)注射SP受體拮抗劑Sp

9、antide和CGRP受體拮抗劑BIBN4096BS的小鼠皮膚移植物平均存活時(shí)間為19天。
　　結(jié)論:
　　SP和CGRP調(diào)節(jié)均能夠延長(zhǎng)小鼠異基因皮膚移植物的存活時(shí)間;
　　SP和CGRP調(diào)節(jié)在延長(zhǎng)小鼠異基因皮膚移植物的存活時(shí)間方面無(wú)顯著差異;
　　SP/CGRP共同調(diào)節(jié)能進(jìn)一步顯著延長(zhǎng)小鼠異基因皮膚移植物的存活時(shí)間，說(shuō)明SP和CGRP調(diào)節(jié)在神經(jīng)免疫學(xué)層面也具有協(xié)同作用;
　　與傳統(tǒng)免疫抑制藥物相比，基于S

10、P和CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)異基因皮膚移植物的存活時(shí)間延長(zhǎng)作用有限，但不失為一種有潛力的研究方向。
　　第三章小鼠皮膚移植物中SP和CGRP免疫組織化學(xué)分析和SP mRNA/CGRP mRNA熒光定量PCR分析
　　目的:對(duì)小鼠皮膚移植物中的SP和CGRP從蛋白肽水平和基因水平進(jìn)行定性和定量分析。
　　方法:
　　1、對(duì)小鼠皮膚移植物中的SP和CGRP進(jìn)行免疫組化染色。
　　2、對(duì)小鼠皮膚移植物中的SP m

11、RNA/CGRP mRNA進(jìn)行熒光定量PCR分析。
　　3、熒光定量PCR結(jié)果的分析采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，各指標(biāo)組間比較采用方差分析，方差分析后，兩兩比較使用LSD法，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1、免疫組化結(jié)果顯示，自體皮膚移植小鼠皮膚移植物存活良好，表皮層厚度正常，可見(jiàn)皮膚附件:異體皮膚移植小鼠移植皮片表皮層變薄，皮膚附件消失。
　　2、SP拮抗和CGRP拮抗均能同時(shí)抑制SP和CGRP

12、的表達(dá)，SP+CGRP雙重拮抗使得這種抑制效應(yīng)更加明顯。
　　3、對(duì)施加同種干預(yù)的自體移植和異體移植小鼠進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)異基因皮膚移植組CGRP的表達(dá)程度明顯低于自體皮膚移植組。
　　4、對(duì)接受自體皮膚移植的小鼠進(jìn)行組織內(nèi)SP mRNA定量的組間比較，發(fā)現(xiàn)Ctrl②組SP mRNA的表達(dá)量顯著高于SP②組和SP+CGRP②組，而與CGRP②組無(wú)顯著差異;SP②組SP mRNA的表達(dá)量顯著低于CGRP②組，與SP+CGRP②組S

13、P mRNA的表達(dá)量無(wú)顯著差異; CGRP②組SP mRNA的表達(dá)量顯著高于SP+CGRP②組。
　　5、對(duì)接受異體皮膚移植的小鼠進(jìn)行組織內(nèi)SP mRNA定量的組間比較，發(fā)現(xiàn)Ctrl①組SP mRNA的表達(dá)量顯著高于SP①組、CGRP①組和SP+CGRP①組;SP①組SP mRNA的表達(dá)量顯著低于CGRP①組和SP+CGRP①組;CGRP①組SP mRNA的表達(dá)量顯著高于SP+CGRP①組。
　　6、對(duì)接受自體皮膚移植的小鼠

14、進(jìn)行組織內(nèi)CGRP mRNA定量的組間比較，發(fā)現(xiàn)Ctrl②組CGRP mRNA的表達(dá)量顯著高于CGRP②組，而與SP②組和SP+CGRP②組無(wú)顯著差異;SP②組CGRP mRNA的表達(dá)量顯著高于CGRP②組和SP+CGRP②組;CGRP②組CGRPmRNA的表達(dá)量顯著高于SP+CGRP②組。
　　7、對(duì)接受異體皮膚移植的小鼠進(jìn)行組織內(nèi)CGRP mRNA定量的組間比較，發(fā)現(xiàn)Ctrl①組CGRP mRNA的表達(dá)量顯著高于CGRP①組和

15、SP+CGRP①組，而與SP①組無(wú)顯著差異:SP①組CGRP mRNA的表達(dá)量顯著高于CGRP①組和SP+CGRP①組;CGRP①組CGRPmRNA的表達(dá)量與SP+CGRP①組無(wú)顯著差異。
　　8、對(duì)接受同一干預(yù)的皮膚移植小鼠分別進(jìn)行異體-自體之間SPmRNA表達(dá)量的比較:接受生理鹽水注射的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)SP mRNA表達(dá)量顯著低于異體移植小鼠;接受SP受體拮抗劑的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)SP mRNA表達(dá)量顯著高于

16、異體移植小鼠;接受CGRP受體拮抗劑的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)SPmRNA表達(dá)量與異體移植小鼠無(wú)顯著差異;接受SP+CGRP雙重拮抗的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)SP mRNA表達(dá)量顯著低于異體移植小鼠。
　　9、對(duì)接受同一干預(yù)的皮膚移植小鼠分別進(jìn)行異體-自體之間CGRP mRNA表達(dá)量的比較:接受生理鹽水注射的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)CGRP mRNA表達(dá)量顯著低于異體移植小鼠;接受SP受體拮抗劑的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)C

17、GRP mRNA表達(dá)量顯著低于異體移植小鼠;接受CGRP受體拮抗劑的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)CGRP mRNA表達(dá)量顯著高于異體移植小鼠;接受SP+CGRP雙重拮抗的自體移植小鼠其皮膚移植物內(nèi)CGRP mRNA表達(dá)量顯著高于異體移植小鼠。
　　結(jié)論:
　　在小鼠皮膚移植模型中，外科手術(shù)是神經(jīng)原性炎癥的始動(dòng)因素，繼發(fā)的神經(jīng)原性炎癥的自我增強(qiáng)和產(chǎn)生神經(jīng)免疫學(xué)效應(yīng)不依賴(lài)于外科手術(shù)的影響而獨(dú)立存在;
　　單一阻斷SP與其受體

18、結(jié)合不但影響SP的合成和表達(dá)，同時(shí)也影響CGRP的合成和表達(dá);在單獨(dú)使用CGRP拮抗劑的小鼠體內(nèi)也觀察到類(lèi)似的現(xiàn)象，這說(shuō)明SP和CGRP具有交叉反饋和協(xié)同作用;
　　SP+CGRP雙拮抗能進(jìn)一步降低SP和CGRP的表達(dá)，但不能完全阻斷SP和CGRP的表達(dá)，這可能是神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)一個(gè)重要的缺陷，也是本研究中異基因皮膚移植物存活時(shí)間不長(zhǎng)的原因之一:
　　機(jī)體在面對(duì)異基因移植物時(shí)，可能會(huì)在神經(jīng)免疫學(xué)層面產(chǎn)生一種免疫增強(qiáng)機(jī)制，加速免疫

19、反應(yīng)對(duì)皮膚移植物的破壞，而SP+CGRP雙拮抗能有效減弱這種效應(yīng);
　　在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中，神經(jīng)肽mRNA的表達(dá)和神經(jīng)肽的產(chǎn)生并不呈絕對(duì)的線(xiàn)性關(guān)系;
　　與神經(jīng)原性炎癥相比，同種異體免疫反應(yīng)能夠顯著促進(jìn)皮膚移植物中SP mRNA的表達(dá)。
　　第四章皮膚移植小鼠外周血Th1因子和Th2因子的檢測(cè)
　　目的:通過(guò)檢測(cè)接受皮膚移植小鼠外周血中的Th1因子IFN-γ、IL-2和Th2因子IL-10，間接評(píng)估神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)

20、對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)的影響。
　　方法:
　　1、利用ELISA技術(shù)對(duì)小鼠外周血中的Th1因子IFN-γ和IL-2進(jìn)行定量檢測(cè)。
　　2、利用ELISA技術(shù)對(duì)小鼠外周血中的Th2因子IL-10進(jìn)行定量檢測(cè)。
　　3、采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，各指標(biāo)組間比較采用方差分析，方差分析后，兩兩比較使用LSD法，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1、神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)使接受自體/異體皮膚移植

21、的小鼠外周血IFN-γ表達(dá)量下降，且影響作用的大小依次為SP+CGRP雙重拮抗＞CGRP拮抗＞SP拮抗＞NS。
　　2、神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)使接受自體/異體皮膚移植的小鼠外周血IL-2表達(dá)量下降，且影響作用的大小依次為SP+CGRP雙重拮抗＞CGRP拮抗＞SP拮抗＞NS。
　　3、神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)使接受自體/異體皮膚移植的小鼠外周血IL-10表達(dá)量增加，且影響作用的大小依次為SP+CGRP雙重拮抗＞CGRP拮抗＞SP拮抗＞NS。

22、　　4、對(duì)接受不同干預(yù)措施的小鼠進(jìn)行組間自體-異體比較，發(fā)現(xiàn)異體移植小鼠外周血IL-2、IFN-γ、IL-10的表達(dá)量均低于自體移植組，且絕大部分干預(yù)組均有顯著差異。
　　結(jié)論:
　　1、從Th1和Th2亞群細(xì)胞因子的角度進(jìn)行分析，基于SP和CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)確實(shí)能夠?qū)Ξ惢蚱つw移植物產(chǎn)生保護(hù)作用，這種保護(hù)作用的強(qiáng)度表現(xiàn)為:SP+CGRP雙重拮抗＞CGRP拮抗＞SP拮抗。
　　2、在自體皮膚移植組，神經(jīng)肽拮抗劑也能

23、引起Th1因子和Th2因子產(chǎn)生類(lèi)似于異基因皮膚移植小鼠外周血表達(dá)含量的變化，這說(shuō)明這種神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段對(duì)免疫系統(tǒng)的影響不依賴(lài)于異基因免疫反應(yīng)的存在。
　　3、GCRP拮抗對(duì)異基因皮膚移植組小鼠Th1因子的影響要大于對(duì)自體皮膚移植組小鼠Th1因子的影響，這種調(diào)節(jié)方式對(duì)Th2因子的影響在兩組之間則沒(méi)有體現(xiàn)出差異，這可能與CGRP在異基因皮膚移植小鼠模型中表達(dá)下降有關(guān)，這也是本研究所揭示的CGRP拮抗所產(chǎn)生的免疫保護(hù)作用強(qiáng)于SP拮抗的原

24、因。
　　第五章小鼠淋巴細(xì)胞活化通路關(guān)鍵信號(hào)分子定量分析
　　目的:對(duì)皮膚移植小鼠淋巴細(xì)胞活化三條通路上的關(guān)鍵信號(hào)分子進(jìn)行定量分析，檢測(cè)神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段會(huì)如何對(duì)上述通路產(chǎn)生影響，
　　方法:
　　1、利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)小鼠MAPK通路信號(hào)分子的表達(dá)進(jìn)行定量分析。
　　2、利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)小鼠Calcineurin/NFAT通路信號(hào)分子的表達(dá)進(jìn)行定量分析。
　　3、利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)

25、小鼠JAK-STAT通路信號(hào)分子的表達(dá)進(jìn)行定量分析。
　　4、采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，各指標(biāo)組間比較采用方差分析，方差分析后，兩兩比較使用LSD法，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1、對(duì)MAPK通路的4個(gè)關(guān)鍵信號(hào)分子進(jìn)行定量分析，發(fā)現(xiàn)基于SP/CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段對(duì)ERK基因表達(dá)無(wú)影響;對(duì)JNK2基因表達(dá)的影響可能主要和炎癥反應(yīng)有關(guān);該調(diào)節(jié)對(duì)JNK1基因和P38MAPK基因表達(dá)

26、產(chǎn)生的影響正好相反:SP調(diào)節(jié)促進(jìn)自體皮膚移植小鼠P38 MAPK基因的表達(dá)，抑制異體皮膚移植小鼠JNK1基因的表達(dá)，CGRP調(diào)節(jié)抑制異體皮膚移植小鼠P38 MAPK基因的表達(dá)，促進(jìn)自體皮膚移植小鼠JNK1基因的表達(dá)。
　　2、對(duì)Calcineurin/NFAT通路的2個(gè)基因進(jìn)行了定量分析，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)能夠同時(shí)促進(jìn)Calcineurin/NFAT通路中的NFAT基因和Calcineurin基因表達(dá)增加，其中SP調(diào)節(jié)誘導(dǎo)NFAT基

27、因表達(dá)的作用較強(qiáng)，而CGRP調(diào)節(jié)誘導(dǎo)Calcineurin基因表達(dá)的作用較強(qiáng)。
　　3、對(duì)JAK/STAT通路的2個(gè)基因進(jìn)行了定量分析，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)JAK1基因和Tyk2的表達(dá)幾乎無(wú)明顯影響。
　　結(jié)論:
　　1、基于SP/CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段對(duì)MAPK通路的ERK基因和JNK2基因表達(dá)無(wú)影響或與移植物的存活無(wú)關(guān);對(duì)JNK1基因和P38 MAPK基因表達(dá)產(chǎn)生的影響正好相反:SP調(diào)節(jié)促進(jìn)自體皮膚移植小鼠P38

28、 MAPK基因的表達(dá)，抑制異體皮膚移植小鼠JNK1基因的表達(dá)，CGRP調(diào)節(jié)抑制異體皮膚移植小鼠P38 MAPK基因的表達(dá)，促進(jìn)自體皮膚移植小鼠JNK1基因的表達(dá)。
　　2、基于SP/CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)手段能夠同時(shí)促進(jìn)Calcineurin/NFAT通路中的NFAT基因和Calcineurin基因表達(dá)增加，其中SP調(diào)節(jié)誘導(dǎo)NFAT基因表達(dá)的作用較強(qiáng)，而CGRP調(diào)節(jié)誘導(dǎo)Calcineurin基因表達(dá)的作用較強(qiáng)。
　　3、基于

29、SP/CGRP的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)對(duì)JAK1基因表達(dá)無(wú)影響;對(duì)異體移植小鼠Tyk2的表達(dá)幾乎無(wú)明顯影響。
　　第六章小鼠外周血CD4+CD25+Treg和Foxp3的表達(dá)檢測(cè)
　　目的:探索神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)是否具有足夠的誘導(dǎo)CD4+CD25+Treg形成的能力。
　　方法:
　　1.利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)小鼠皮膚移植物中的Foxp3進(jìn)行定量分析;
　　2.利用流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)小鼠外周血中的CD4+CD25+Treg細(xì)

30、胞進(jìn)行分選和檢測(cè);
　　3.熒光定量PCR的結(jié)果使用SPSS18.0進(jìn)行分析，流式細(xì)胞技術(shù)的結(jié)果使用BD FACS CantoTMⅡ統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各指標(biāo)組間比較采用方差分析，方差分析后，兩兩比較使用LSD法，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1.接受神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)的小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs細(xì)胞的百分比升高，這種調(diào)節(jié)方式對(duì)Treg的影響程度依次為SP調(diào)節(jié)＞SP+CGRP調(diào)節(jié)＞CGRP調(diào)節(jié)

31、＞NS對(duì)照(P＜0.05);
　　2.將施加同一種干預(yù)的自體移植小鼠和異體移植小鼠進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)各組自體移植小鼠外周血中CD4+CD25+Foxp3+Tregs細(xì)胞的百分比均顯著低于異體移植小鼠(P＜0.05);
　　3.Foxp3 mRNA定量的結(jié)果和CD4+CD25+Foxp3+Tregs流式細(xì)胞檢測(cè)的結(jié)果并不完全一致，這可能是由于標(biāo)本來(lái)源不同所致。
　　結(jié)論:
　　1.神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)能夠促使小鼠外周血CD4+