鎮(zhèn)靜藥物對同種異體心臟移植術(shù)后小鼠免疫反應(yīng)的影響.pdf

1、目的:臨床上器官移植仍是唯一有效延長終末器官衰竭患者生存期的治療方案。隨著移植手術(shù)技術(shù)上成功率逐年增加，實(shí)體器官移植術(shù)后生存期一再延長，不僅得益于手術(shù)技術(shù)的發(fā)展本身，術(shù)后的免疫抑制方案亦是促進(jìn)移植物長期生存的關(guān)鍵所在。移植術(shù)后早期，疼痛能影響人體促炎和抗炎系統(tǒng)的平衡，鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜藥物也被證實(shí)影響此平衡。對于移植術(shù)后的患者而言，在接受免疫抑制劑治療的同時還接受鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜藥物治療。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谟^察兩種術(shù)后ICU常用的鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛藥物在心臟移植術(shù)后初

2、期對免疫系統(tǒng)及移植物產(chǎn)生的影響。
　　方法:首先，選用兩種臨床術(shù)后常用的鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛藥物:右旋美托嘧啶(Dex)和芬太尼(Fen)作為研究對象，通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)觀察兩種藥物不同劑量下對淋巴細(xì)胞增殖的能力的影響。其次，根據(jù)熱板實(shí)驗(yàn)對本實(shí)驗(yàn)體內(nèi)藥物劑量進(jìn)行篩選。構(gòu)建小鼠同種異體心臟移植模型后，單用選取劑量應(yīng)用于移植受體，每天記錄移植物的搏動狀況和小鼠體重的改變。選擇術(shù)后第4，6天作為監(jiān)測點(diǎn)，取移植物進(jìn)行H&E染色并對其淋巴細(xì)胞浸潤程度

3、進(jìn)行分級。取受體脾臟T淋巴細(xì)胞進(jìn)行混合淋巴試驗(yàn)(MLR)觀察藥物體內(nèi)抑制作用。采集移植受體鼠脾臟、淋巴結(jié)分離淋巴細(xì)胞，使用流失細(xì)胞儀對模型鼠外周淋巴器官Treg;Tr1; Th1;B細(xì)胞數(shù)量和比例進(jìn)行檢測。探討不同鎮(zhèn)靜藥物對移植物和受體外周免疫系統(tǒng)的影響。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)芬太尼及右旋美托嘧啶對小鼠離體脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖抑制作用且與藥物濃度呈正相關(guān)，F(xiàn)en在較低濃度即產(chǎn)生抑制效應(yīng)，Dex組則在較高濃度才出現(xiàn)抑制。同等藥物濃度下

4、芬太尼抑制效應(yīng)強(qiáng)于右旋美托嘧啶;熱板試驗(yàn)結(jié)果示，兩種藥物均有鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛作用，且呈劑量依賴性。根據(jù)熱板實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選取亞睡眠劑量應(yīng)用于體內(nèi)模型。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):兩實(shí)驗(yàn)組均能延長移植物生存期，Dex組生存期相對離散，而Fen組排斥時間點(diǎn)較為集中，多在8天左右出現(xiàn)排斥。移植物病理檢測發(fā)現(xiàn)，三組移植物淋巴細(xì)胞浸潤呈現(xiàn)明顯差異，F(xiàn)en組移植物內(nèi)淋巴細(xì)胞明顯低于其余兩組。MLR試驗(yàn)結(jié)果顯示:移植術(shù)后4天，兩實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞對供體細(xì)胞刺激反應(yīng)性減弱，F(xiàn)en組增殖

5、最弱;術(shù)后6天，試驗(yàn)組抑制效應(yīng)均減弱。流式細(xì)胞檢測發(fā)現(xiàn)，移植術(shù)后4天，Dex組B細(xì)胞數(shù)量降低，芬太尼組Th1型細(xì)胞減少。術(shù)后6天可見Dex組B細(xì)胞含量仍保持較低水平，芬太尼組Th1型細(xì)胞抑制消失。
　　結(jié)論:實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的阿片類μ受體激動劑芬太尼無論在體內(nèi)還是體外都具有明顯的免疫抑制效果，而體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)芬太尼在移植術(shù)后早期對Th1型細(xì)胞的抑制能有效抑制受體淋巴細(xì)胞對移植物血管內(nèi)皮的攻擊，但術(shù)后晚期抑制解除并在此后短時期內(nèi)移植物被受體