復(fù)方甲亢片對甲亢合并肝損害大鼠血清抗體及肝核受體的影響.pdf

1、目的： 通過甲亢合并肝損害大鼠模型，采用復(fù)方甲亢片進(jìn)行研究觀察，提高臨床對甲亢合并肝損害機(jī)理認(rèn)識，探討復(fù)方甲亢片對甲亢合并肝損害大鼠肝臟保護(hù)及作用相關(guān)機(jī)理。 方法： 通過選用健康Wistar大鼠98只，體重約120±15g，雌雄各半，將98大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分出20只作為空白對照組?？瞻讓φ战M每天上午給以2ml蒸餾水喂服。造模組先隨機(jī)分出20只作輕度甲亢造模(以濃度為50μg/ml的左旋甲狀腺素鈉片2ml

2、混懸液灌胃，即低量造模組)，其余58只按重度甲亢造模(以濃度為100μg/ml的左旋甲狀腺素鈉片2ml混懸液灌胃，即高量造模)。輕度甲亢、重度甲亢每日上午分別相應(yīng)濃度的左旋甲狀腺素鈉片2ml混懸液灌胃，每天一次，連續(xù)28天。第29天，先分別從空白對照組、低量造模組、高量造模組各組隨機(jī)取10只大鼠進(jìn)行(即第四周)FT3、FT4、TSH及ALT、AST、r-GT、ALP、TP、ALB、GLB、TBiL、DbiL_、IbiL指標(biāo)檢測。

3、 再將48只重度甲亢大鼠隨機(jī)分為四組，即高量造模組、甲巰咪唑組、單純中藥組、復(fù)方片劑組，每組12只。 自造模第29天開始，空白對照組仍繼續(xù)每天上午給以2ml蒸餾水喂服，低量造模組仍以濃度為50μg/ml的左旋甲狀腺素鈉片2ml混懸液灌胃，高量造模組及用藥組仍以濃度為100μg/ml的左旋甲狀腺素鈉片2ml混懸液灌胃，每日上午一次。此外，下午加灌一次，即空白對照組、低量造模組、高量造模組每日灌2ml蒸餾水，甲巰咪唑組灌服甲巰咪唑液

4、2ml，單純中藥組灌服純中藥液2ml，復(fù)方片劑組灌服復(fù)方甲亢片混懸液2ml，連續(xù)32天。 實驗結(jié)束后，留取相應(yīng)標(biāo)本。用放免法測定血清。FT3、FT4、TSH含量；用全自動生化儀檢測ALT、AST、r-GT、ALP、TP、ALB、GLB、TBiL、DbiL、IbiL；稱大鼠肝重、體重，計算肝指數(shù)；用放免法測定血清 TGAb、TMAb；用生化儀檢測SMA、AMA；以逆轉(zhuǎn)錄．多聚酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測肝核受體LXRa、FXR基

5、因表達(dá)。 結(jié)果： 1、體重情況，各組均明顯增加，但模型組增幅小。具體變化： 第四周，空白對照組、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與空白對照組有極顯著性差異(P<0.01)。 第八周，空白對照組、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與空白對照組有極顯著性差異(P<0.01)；治療組大鼠體重增加，與高量造模組有顯著性差異(P<0.05)，復(fù)方片劑

6、組、甲巰咪唑組優(yōu)于單純中藥組。 2、飲食量、排泄量。各組均明顯增加，但空白對照組增幅小。具體變化： 第四周，模型組明顯增加，與空白對照組有顯著性差異(P<0.05)；高量造模組與低量造模組無顯著性差異(P>0.05)。 第八周，低量造模組飲食量、排泄量最大?？瞻讓φ战M、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與低量造模組有極顯著性差異(P<0.01)；各治療組飲食量、排泄量減少，與高量造

7、模組有顯著性差異(P<0.05)，復(fù)方片劑組、單純中藥組優(yōu)于甲巰咪唑組。 3、甲狀腺功能FT3、FT4、TSH指標(biāo)變化： 第四周，F(xiàn)T3、FT4升高、TSH降低，空白對照組、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與空白對照組有極顯著性差異(P<0.01)。 第八周縱向?qū)Ρ?與第四周各組自行對比)，低量造模組FT3、FT4繼續(xù)升高、TSH繼續(xù)降低，有顯著性差異(P<0.05)；空白對照組

8、、高量造模組，無顯著性差異(P>0.05)。 第八周橫向?qū)Ρ?各組間對比)，模型組FT3、FT4升高、TSH降低，空白對照組、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與空白對照組有極顯著性差異(P<0.01)。治療后治療組FT3、FT4降低、TSH升高，各治療組與高量造模組，有顯著性差異(P<0.05)，治療作用有甲巰咪唑組>復(fù)方片劑組>單純中藥組。 4、肝功能指標(biāo)。GLB、TBiL、DbiL、

9、IBiL各組無顯著性差異(P>0.05)。ALT、AST、r-GT、ALP，TP、ALB具體變化： 第四周，模型組ALT、AST、r-GT、ALP升高，TP、ALB降低，模型組與正常組有顯著差異(P<0.05)，低量造模組與高量造模組無顯著性差異(P>0.05)。 第八周縱向?qū)Ρ?與第四周各組自行對比)，模型組ALT、AST、r-GT、ALP升高，有顯著性差異(P<0.05)，TP、ALB降低僅在高量組中有顯著性差異(P

10、<0.05)。 第八周橫向?qū)Ρ?各組間對比)，模型組ALT、AST、r-GT、ALP升高，空白對照組、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，高量造模組與空白對照組有極顯著性差異(P<0.01)。TP、ALB降低僅在高量組中有顯著性差異(P<0.05)；治療后治療組ALT、AST、r-GT、ALP降低，各治療組與高量造模組，有顯著性差異(P<0.05)，治療作用有復(fù)方片劑組>單純中藥組>甲巰咪唑組。治療后治療組T

11、P、ALB升高，治療作用復(fù)方片劑組優(yōu)于單純中藥組、甲巰咪唑組。 5、肝指數(shù)變化肝指數(shù)，模型組明顯上升，各組間有顯著性差異(P<0.05)；治療后，各治療組與高量造模組肝指數(shù)明顯降低，各組間有顯著差異(P<0.05)，按其降低強(qiáng)弱，有復(fù)方片劑組>單純中藥組>甲巰咪唑組。 6、血清TGAb、TMAb、SMA、AMATGAb僅在高量造模組與空白對照組、高量造模組與復(fù)方片劑組間有顯著性差異(P<0.05)，其余各間無顯著性差異(

12、P>0.05)，提示復(fù)方甲亢片對TGAb調(diào)控有一定優(yōu)勢。 TMAb、SMA、AMA，模型組升高?？瞻讓φ战M、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，空白對照組與高量造模組有極顯著性差異(P<0.01)；各治療組TMAb、SMA、AMA含量降低，與高量造模組，有顯著性差異(P<0.05)，且復(fù)方片劑組與高量造模組有極顯著性差異(P<0.01)。治療作用有復(fù)方片劑組優(yōu)于單純中藥組、甲巰咪唑組。 7、肝核受體L

13、XRα、FXR mRNA表達(dá)。各組中，LXRα、FXR mRNA表達(dá)，模型組明顯降低?？瞻讓φ战M、低量造模組、高量造模組間均有顯著性差異(P<0.05)，空白對照組與高量造模組有極顯著性差異(P<0.01)；各治療組LXRα、FXR．mRNA表達(dá)增強(qiáng)，與高量造模組，有極顯著性差異(P<0.05)，且復(fù)方片劑組、甲巰咪唑組與單純中藥組有顯著性差異(P<0.05)。治療作用復(fù)方片劑組、甲巰咪唑組優(yōu)于單純中藥組。 結(jié)論： 1、

14、甲亢合并肝損害其損害程度與機(jī)體甲狀腺激素水平、病程密切相關(guān)。甲狀腺激素水平越高、病程越長，易出現(xiàn)肝損害。 2、復(fù)方甲亢片對甲亢合并肝損害防治機(jī)理，可能通過降低甲狀腺激素水平、改善肝氧化代謝、降低自身抗體水平、上調(diào)肝核受體基因表達(dá)，促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)，達(dá)到防治甲亢和發(fā)揮保肝護(hù)肝的作用。 3、復(fù)方甲亢片對甲亢合并肝損害防治作用明顯優(yōu)于單用甲巰咪唑或單純中藥，可能在于通過減少西藥用量，減輕了西藥毒副作用；減輕了甲亢其它并發(fā)癥，利于