vgb基因在抗蟲棉中的功能研究.pdf

1、植物中存在著控制和應(yīng)答氧水平的敏感體系，從而維持穩(wěn)定的氧水平，這對(duì)于避免不必要的能量喪失以及植物穩(wěn)定生長(zhǎng)至關(guān)重要。已知透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)在大腸桿菌中的表達(dá)明顯促進(jìn)了細(xì)胞在微氧條件下的生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成能力。因此本文對(duì)轉(zhuǎn)透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)的抗蟲棉進(jìn)行研究，通過該基因?qū)γ藁ùx水平和棉花生長(zhǎng)的影響，確定其在抗蟲棉增產(chǎn)和抗?jié)撤矫娴墓δ芎妥饔谩?首先利用分子生物學(xué)方法對(duì)轉(zhuǎn)vgb基因的抗蟲棉進(jìn)行鑒定：PCR檢測(cè)到Bt

2、基因和vgb基因已整合到棉花基因組中；Southern雜交確定vgb基因在抗蟲棉中的拷貝數(shù)為多個(gè)拷貝；用Bt免疫試紙條檢測(cè)轉(zhuǎn) vgb 基因的抗蟲棉有Bt殺蟲蛋白存在，并進(jìn)一步用ELISA檢測(cè)Bt蛋白表達(dá)量；并用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了vgb 基因在棉花中的表達(dá)量。表明 vgb 基因和歷基因均整合到棉花基因組中，且穩(wěn)定的表達(dá)。 通過大田試驗(yàn)對(duì)轉(zhuǎn) vgb 基因抗蟲棉的三個(gè)株系進(jìn)行棉花生理活動(dòng)跟蹤調(diào)查得出以下結(jié)論：轉(zhuǎn)vgb基因抗蟲棉在

3、表現(xiàn)對(duì)棉鈴蟲顯著抗性的同時(shí)，棉花種子的子葉展開和真葉出現(xiàn)從總體上顯著早于對(duì)照棉花材料；葉綠素含量較對(duì)照提高15﹪-20﹪；棉花花期較對(duì)照提前3-5天；單株結(jié)鈴數(shù)較對(duì)照增多，但衣分沒有變化：三個(gè)株系的棉花產(chǎn)量均明顯提高，其中轉(zhuǎn)vgb 啦基因株系1的棉花子棉較單轉(zhuǎn)Bt的棉花增加了134.5﹪，皮棉較其增長(zhǎng)了150.2﹪，表現(xiàn)最優(yōu)；生育期較對(duì)照縮短了10天左右；對(duì)轉(zhuǎn)vgb基因的抗蟲棉進(jìn)行苗期和花期為期15天的淹水試驗(yàn)，檢測(cè)SOD、CAT、MA