Notch信號在體外牙髓細胞分化中的表達及其調(diào)控的實驗研究.pdf

1、該研究分三個部分進行:以體外連續(xù)培養(yǎng)分化、鈣化的人牙髓細胞為研究對象,首先利用酶動力學法、光鏡、電子顯微鏡、鈣質(zhì)染色等方法對其生物學特性進行研究,確定我們所培養(yǎng)的牙髓細胞能否向成牙本質(zhì)樣細胞分化,從而判定此連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)是否可作為研究牙髓損傷修復(fù)細胞分化的體外模型;第二步用酶動力學法、MTT比色法研究rhBMP<,2>對連續(xù)培養(yǎng)的人牙髓細胞生物學特性的影響,并通過制作大鼠牙髓損傷修復(fù)模型,以免疫組織化學方法檢測體內(nèi)外牙髓損傷修復(fù)過程中BM

2、P<,2>的表達;在此基礎(chǔ)上,第三步用免疫組織化學、Westernblot等方法對體外人牙髓細胞增殖、分化、鈣化過程中Notch<,2>及其配體Delta的表達進行定性及半定量研究,從它們的表達部位及表達水平變化探討Notch信號途徑在牙髓細胞增殖、分化中的作用,并通過對培養(yǎng)系統(tǒng)中加入的rhBMP<,2>對Notch信號成員表達影響的研究,探討Notch信號途徑與信號分子rhBMP<,2>的關(guān)系.從信號分子的作用及細胞對信號的反應(yīng)性角度