含對(duì)蝦白斑綜合癥病毒ie1啟動(dòng)子的重組桿狀病毒介導(dǎo)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因轉(zhuǎn)移.pdf

1、隨著攜帶哺乳動(dòng)物細(xì)胞啟動(dòng)子的重組桿狀病毒逐漸成為基因功能研究、非復(fù)制型載體疫苗研制以及開發(fā)基因治療策略的一個(gè)非常有效的工具，尋找一種在昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞之間的穿梭啟動(dòng)子對(duì)于桿狀病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移方面的研究非常必要。 在本研究中，我們利用對(duì)蝦白斑綜合癥病毒 (white spot syndrome virus，WSSV) 的iel啟動(dòng)子和桿狀病毒ETL啟動(dòng)子以及桿狀病毒多角體啟動(dòng)子，分別構(gòu)建了含有不同啟動(dòng)子調(diào)控下的EGFP報(bào)告

2、基因表達(dá)盒的重組桿狀病毒，然后轉(zhuǎn)導(dǎo)不同哺乳動(dòng)物細(xì)胞，以檢測(cè)不同啟動(dòng)子在細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)和表達(dá)效率。結(jié)果顯示，WSSV的iel啟動(dòng)子在昆蟲細(xì)胞sf9中具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子活性，能夠控制報(bào)告基因的高效表達(dá)，同時(shí)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，iel 啟動(dòng)子與 ETL 啟動(dòng)子一樣在不同哺乳動(dòng)物細(xì)胞中均有活性，能夠介導(dǎo)EGFP不同水平的表達(dá)，并且丁酸鈉能夠提高iel啟動(dòng)子在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)和表達(dá)效率。轉(zhuǎn)移載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染結(jié)果證實(shí)，iel啟動(dòng)子能夠直接啟動(dòng)外源基因在哺