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文檔簡介
1、中南大學博士學位論文LMO4/pCREB/pStat3在局灶性腦缺血再灌注大鼠中的表達及依達拉奉的干預研究姓名:許賢平申請學位級別:博士專業(yè):神經(jīng)病學指導教師:楊期東;楊曉蘇20100601博士學位論文 中文摘要5 級標準評分法評價神經(jīng)功能缺損,分別在各再灌注時間點處死動物。常規(guī)H E 染色觀察組織病理學改變;尼氏染色觀察神經(jīng)元的存活;M a p 2 抗體染色觀察神經(jīng)元樹突;T U N E L 法檢測缺血腦組織的凋亡細胞;免疫熒光檢測、
2、L M 0 4 、p C R E B 、p S t a t 3 的在缺血半暗帶皮層細胞的表達數(shù)量及部位;免疫熒光雙標觀察L M 0 4 與M a p 2 、p C R E B 、p S t a t 3 、T U N E L 陽性細胞之間以及p C R E B 、p S t a t 3 與N E U N的共表達情況。R T - P C R 法測定假手術(shù)組及再灌后不同時間點L M 0 4m R N A 在缺血半暗帶的表達水平;w e s t
3、 e r n —b l o t 法測定假手術(shù)組及再灌后不同時間點L M 0 4 和p S t a t 3 、p C R E B 三分子在缺血半暗帶中的蛋白表達水平。結(jié)果:①模型成功率為7 6 .6 0 %,死亡率為1 3 .8 3 %,主要死亡原因為蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦水腫;腦組織T T C 染色顯示成功模型大鼠出現(xiàn)皮層和紋狀體梗死,而假手術(shù)組大鼠未見梗死。②模型組H E 染色可見典型的壞死灶、神經(jīng)元丟失和組織水腫,梗死區(qū)細胞總數(shù)目呈減少
4、趨勢,假手術(shù)組細胞形態(tài)正常;③模型組尼氏染色可見細胞腫脹,尼氏體消失,缺血半暗帶皮層區(qū)存活神經(jīng)元數(shù)目隨再灌時間逐漸減少( P < O .0 5 ) ,4 8 小時最低( P< O .0 1 ) ,假手術(shù)組神經(jīng)元形態(tài)正常;④模型組樹突長度變短,直徑變小,缺血半暗帶皮層區(qū)M A P 2陽性細胞O D 值隨再灌時間逐漸減少,4 8 小時最低( P < 0 .0 1 ) ,假手術(shù)組神經(jīng)元樹突形態(tài)正常;⑤T U N E L 陽性
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