依達拉奉治療短暫腦缺血再灌注損傷療效的MR評價和病理對照研究.pdf

1、目的：缺血性腦卒中在臨床上是一種常見的內(nèi)科疾病，隨著人們生活水平的提高，發(fā)病率不斷提高。臨床早期治療的目的主要是挽救IP，阻止IP發(fā)展為不可逆性腦梗死。早期溶栓療法是得到廣泛認同的治療方法，是搶救IP的關(guān)鍵，減輕再灌注損傷的核心是積極采取腦保護措施。給予自由基清除劑是一種可行的治療腦梗死的方案。依達拉奉(edaravone，MCI-186)是一種新型自由基清除劑，大量的實驗研究表明，該藥通過清除自由基而抑制脂質(zhì)過氧化作用，減少血管內(nèi)皮細

2、胞、神經(jīng)細胞損傷，減少羥自由基(-OH)產(chǎn)生和缺血半暗帶的面積，抑制遲發(fā)性神經(jīng)細胞壞死，改善神經(jīng)功能，抑制缺血性腦水腫。由于缺血性腦卒中人數(shù)的增加，行早期溶栓療法的卒中病人也越來越多。 MR擴散加權(quán)成像(difusion weighted imaging，DWI)和灌注加權(quán)成像(peffusion weighted imaging，PWI)序列的出現(xiàn)使MRI具備了早期診斷缺血性腦卒中和確定IP是否存在及其存在時間長短和范圍的能力

3、，可為早期溶栓治療和神經(jīng)保護劑的運用提供直觀、個性化的影像學(xué)信息。運用DWI和PWI對依達拉奉治療短暫腦缺血再灌注損傷的療效進行評價，目前國內(nèi)外尚無這方面的報道。為此，本實驗采用線栓法建立兔大腦中動脈阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)缺血30min再灌注模型，對72h內(nèi)不同時間點的兔進行DM和PWI檢查并與光鏡、免疫組化相對照，研究IP的影像學(xué)演變規(guī)律，評價DWI和PWI在超早期溶栓療效評

4、價中的應(yīng)用價值。 方法：新西蘭大白兔48只(河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供)，雌雄不限，4～6月齡，體重2.5-3.5kg。隨機分為3組：依達拉奉組(n=20)，線栓法局灶性缺血再灌注模型+生理鹽水組，缺血再灌注組(n=20)，線栓法局灶性缺血再灌注模型+依達拉奉，假手術(shù)組(n=8)。各組根據(jù)不同時間點又分為缺血30min再灌注12h、24h、48h和72h 4個亞組，依達拉奉組和缺血再灌注組每個亞組5只，假手術(shù)組每個亞組2只。新

5、購?fù)迷趧游飳嶒炛行娘曫B(yǎng)一周后開始實驗。術(shù)前禁食12小時，自由飲水。2％的戊巴比妥鈉按1ml/kg(20mg/kg)經(jīng)耳緣靜脈緩慢注射行靜脈麻醉，仰臥位固定于兔臺上，保持自主呼吸，頸部備皮后，消毒，鋪單。在無菌條件下行頸部正中切口，分離皮下組織和肌層，暴露左側(cè)頸總及頸內(nèi)、外動脈，選擇直徑0.53mm導(dǎo)絲從頸總動脈至頸內(nèi)動脈插入大腦中動脈遇阻即止，造成MCAO。并行MRI檢查，DWI高信號，確定造模成功。并于缺血再灌注前15min行DWI檢

6、查和缺血30min/再灌注后0.5h、1h、2h、4h、6h、12h、24h、48h、72h行頭顱MR掃描，掃描序列包括：T1-FLAIR、T2-FLAIR、prop-T2、DWI和PWI掃描。應(yīng)用MR影像學(xué)、光鏡、免疫組化法觀察梗死體積、神經(jīng)功能缺損、表觀彌散系數(shù)比值(ADCR)、CytC釋放和bcl-2蛋白表達。評價DWI和PWI在超早期溶栓療效評價中的應(yīng)用價值。 結(jié)果： (1)納入48只，因造模失敗、死亡等因素脫失7只，

7、最終進入結(jié)果分析41只。(2)假手術(shù)組無神經(jīng)功能缺陷，缺血再灌注組和依達拉奉組評分分別為2.28±0.47和1.31±0.56，二者比較有差異顯著性(P<0.05)。(3)在缺血再灌注組和依達拉奉組，DWI異常在再灌注早期有短暫逆轉(zhuǎn)，但是在4-12h后再次出現(xiàn)，DWI和T2信號變化規(guī)律無明顯差別。(4)病灶中心ADC值比率，依達拉奉組與缺血再灌注組兩組間無差別(P>0.05)，但ADC值比率在兩組不同時間點變化的趨勢不同。(5)病灶周邊

8、ADC值比率，依達拉奉組與缺血再灌注組組間比較差異顯著(P<0.01)，且ADC值比率在兩組不同時間點變化的趨勢不同(P<0.01)，其中依達拉奉組迅速恢復(fù)并維持在正常水平。(6)梗死灶T2WI信號強度值比率：依達拉奉組與缺血再灌注組組間比較差異顯著(P<0.01)，且在兩組不同時間點變化的趨勢不同(P<0.01)，其中依達拉奉組T2WI信號強度值比率上升不明顯。 (7)第72h亞組由T2測得的病灶體積在依達拉奉組為(230±78)mm

9、<'3>與對照組(425±114)mm<'3>相比差異有顯著性(P<0.05)．(8)光學(xué)顯微鏡觀察，依達拉奉組細胞水腫、結(jié)構(gòu)破壞明顯較缺血再灌注組為輕。假手術(shù)組僅可見少量CytC和bcl-2蛋白表達。缺血再灌注組CytC蛋白的表達量顯著多于依達拉奉組(P<0.05)，而依達拉奉組bcl-2蛋白的表達量顯著多于缺血再灌注組(P<0.01)。 結(jié)論：1．缺血30min再灌注主要出現(xiàn)繼發(fā)缺血性損害，在DWI上表現(xiàn)為遲發(fā)性病灶再次出現(xiàn)

10、。2．DWI偽彩圖對確定IP的存在及其存在時間和范圍有一定幫助。3．梗死核心和IP的RADC值不同，利用RADC值可推斷IP是否存在。4．DWI和PWI結(jié)合能靈敏地確定IP的存在及其存在時間和范圍。5．依達拉奉能夠抑制CytC的釋放和上調(diào)bcl-2蛋白表達，對抗缺血再灌注損傷。6．依達拉奉能夠通過抑制細胞毒性水腫和減輕血管源性水腫，對病灶周邊的半暗帶區(qū)有極好的神經(jīng)保護作用。7．結(jié)合DM和T2WI能很好地觀察依達拉奉治療缺血再灌注損傷腦保