我國西瓜果斑病的發(fā)生概況及種子帶菌檢測的研究.pdf

1、西瓜細(xì)菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch)是西瓜、甜瓜上的一種毀滅性病害，由噬酸菌屬燕麥種西瓜亞種(Acidovorax avenae subsp．citrulli)引起，是我國對內(nèi)和對外的重要植物檢疫性有害生物。該病主要通過種子帶菌傳播。隨著我國農(nóng)業(yè)科技和商業(yè)貿(mào)易的發(fā)展，種質(zhì)資源的交換和種子的遠(yuǎn)程運輸十分頻繁和活躍，但由此引起的病害蔓延已對我國的西瓜和甜瓜產(chǎn)業(yè)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。本研究旨在明確我國西瓜、甜瓜的種植分布及

2、西瓜果斑病的發(fā)生情況；建立準(zhǔn)確、快速、靈敏的西瓜果斑病檢測方法，并在實際的種子帶菌檢測中完善該技術(shù)，以有效監(jiān)控和治理該病害。 本文通過收集資料得出，中國西瓜甜瓜的種植面積及總產(chǎn)量均居世界首位，該產(chǎn)業(yè)已成為我國一種具有國際競爭力和較大經(jīng)濟(jì)增長空間的重要園藝產(chǎn)業(yè)，但是，據(jù)統(tǒng)計我國目前已有十個省份的局部地區(qū)有細(xì)菌性果斑病的發(fā)生報道，其中新疆、內(nèi)蒙古、福建、臺灣等地發(fā)病較嚴(yán)重，對當(dāng)?shù)卦斐闪撕艽蟮慕?jīng)濟(jì)損失。另據(jù)調(diào)查表明，我國種類繁多的西瓜

3、甜瓜品種對該病的抗性存在差異，但尚未發(fā)現(xiàn)免疫品種。從調(diào)查不同年份西瓜果斑病發(fā)生情況看，該病的發(fā)生受氣候因子的影響很大，西瓜生產(chǎn)期雨水較多、氣溫較高的年份發(fā)病尤為嚴(yán)重。 本實驗室于2006年建立了免疫捕捉PCR法檢測西瓜果斑病菌，其檢測靈敏度達(dá)50-100cfu/ml，比直接PCR的靈敏度高出100倍左右。本研究在該方法的基礎(chǔ)上，優(yōu)化了種子帶菌檢測的條件，采用MOPS緩沖液在28℃、220r/min搖培4h所得到的病菌要顯著多于其

4、他緩沖液處理和其他溫度處理，因此該浸提條件更易于帶菌量較少的種子檢測。本研究采用不同緩沖液浸提模擬病種進(jìn)行免疫捕捉PCR檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20粒種子在2ml緩沖液種浸提均能檢測出特異性片斷，但是用1ml不同緩沖液浸提1粒模擬病種時，只有MOPS緩沖液的處理可以檢測出帶菌，證明了MOPS緩沖液可以從種子上洗脫出更多的病菌，從而可以提高檢測的靈敏度。病菌在種子上的分布研究結(jié)果顯示，果斑病以附著在種皮上為主，種仁上未檢測到該病菌。對杭州市售種子進(jìn)