辣椒疫病種子帶菌檢測及處理技術(shù)研究.pdf

1、辣椒疫病(Phytophthora capsici)是一種世界性分布的毀滅性病害，嚴(yán)重影響著我國及世界各國的辣椒生產(chǎn)，給種植者造成巨大的經(jīng)濟損失。本研究分別從病害的初侵染源及傳播途徑、檢測技術(shù)和處理技術(shù)等方面進行深入研究，以期為病害的綜合防治提供依據(jù)。
　　 1.采用孢子懸浮液向轉(zhuǎn)色期的辣椒果實胎座注射接種104個/mL孢子懸浮液的方法，可以有效地獲得試驗用辣椒疫病種子。分別采用不同的接種方法和接種濃度對辣椒果實進行接種，之后對

2、辣椒果實的病情指數(shù)、辣椒種子帶菌情況等進行了調(diào)查研究。結(jié)果表明，注射法能有效使辣椒種子感染疫霉菌，其接種濃度為104個/mL孢子懸浮液時，種子帶菌的機率最大。
　　 2.明確了種子帶菌、土壤帶菌是辣椒疫病的主要初侵染來源及重要的傳播途徑。采用注射法、拌土法分別對辣椒果實及土壤接種辣椒疫霉菌，接種后對辣椒種子帶菌和帶菌種子傳病情況以及菌土中種植的辣椒植株發(fā)病情況和土壤中病原菌的存活情況進行了調(diào)查研究。辣椒果實注射接種疫霉菌孢子懸浮

3、液后，能使種子感染疫霉菌，顯著降低發(fā)芽率和出苗率，出土的幼苗在苗期生長階段會發(fā)生疫??；菌土中種植的辣椒植株在生長期持續(xù)的發(fā)生疫病，105 d時發(fā)病率穩(wěn)定，但此時土壤中的疫霉菌依然存活。
　　 3.研制了辣椒疫霉菌的選擇性培養(yǎng)基，可有效檢測辣椒疫病種子帶菌情況。在國內(nèi)外疫霉菌選擇性培養(yǎng)基配方研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合殺菌劑篩選，研制了辣椒疫霉菌的選擇性培養(yǎng)基，匹馬霉素10 mg/L、氨芐青霉素250 mg/L、利福平10 mg/L、五氯硝

4、基苯100 mg/L、惡霉靈100 mg/L、多菌靈10 mg/L，能有效抑制鐮孢菌等雜菌的生長。用此培養(yǎng)基成功地從貯存120 d的辣椒疫病種子上分離出疫霉菌，分離率為2%。
　　 4.建立了辣椒疫霉菌的實時熒光定量PCR檢測技術(shù)，能夠定量檢測辣椒種子中的疫霉菌，靈敏度為10萬粒辣椒種子中有1粒帶菌種子。應(yīng)用Real-time PCR對辣椒種子的DNA進行擴增，分析了辣椒疫霉菌在辣椒種子上的存活時間以及Real-time PCR

5、檢測的極限。經(jīng)過人工模擬種子帶菌檢測，可成功地檢測出10萬粒辣椒種子中的1粒帶菌種子，此時病原菌DNA的最低含量為0.17 fg；此檢測體系可從貯存120、150 d的辣椒疫病種子上檢測出疫霉菌，貯存150 d時病原菌DNA的最低含量為21.3 fg。
　　 5.提出了防治辣椒疫病種子帶菌的處理技術(shù)。結(jié)合辣椒疫病防治藥劑的離體及活體篩選結(jié)果，選用50%烯酰嗎啉可濕性粉劑和20%氟嗎啉可濕性粉劑2種藥劑對辣椒疫病種子進行不同濃度及