白三烯受體基因遺傳多態(tài)性與兒童哮喘關(guān)系的研究.pdf

1、支氣管哮喘(bronchial asthma)簡稱哮喘，是一種以氣道高反應(yīng)性為特征的氣道炎癥性疾病，具有明顯的遺傳傾向。同時，它又是一種多基因遺傳性疾病，有明顯家庭聚集性。在哮喘的發(fā)病過程中，半胱氨酰白三烯作為炎癥性介質(zhì)起到了非常重要的作用。CysLTs是由細(xì)胞(主要是炎癥細(xì)胞)激活后產(chǎn)生的，包括嗜酸性細(xì)胞、肥大細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，甚至上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等均可參與CysLTs的合成。CysLTs最初被描述為過敏癥的慢反應(yīng)物質(zhì)

2、(SRS-A)，參與哮喘發(fā)病的多個環(huán)節(jié)，具有很多生物學(xué)功能，包括引起支氣管收縮，提高血管通透性，促進粘膜分泌滲出，補充過敏性疾病炎癥細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞因子產(chǎn)生，趨化嗜酸性粒細(xì)胞，影響嗜曙紅細(xì)胞程序化死亡，影響神經(jīng)傳遞和改變氣道結(jié)構(gòu)，造成人類氣道平滑肌(ASM)的增殖等。CysLTs具有兩個受體亞型-CysLT1R、CysLT2R。CysLTs關(guān)于哮喘病理生理學(xué)的大部分作用通過CysLT1R的激活被調(diào)節(jié)。CysLTs在哮喘發(fā)病過程中的作用，使

3、得它們成為治療的關(guān)鍵靶點。目前，用于臨床驗證的LTRAs均為LTD4受體拮抗劑。白三烯拮抗劑在哮喘患者中的療效得到世界公認(rèn)。盡管白三烯拮抗劑在哮喘患者中療效顯著，然而并不是所有的哮喘患者使用白三烯拮抗劑后，均能收到滿意的治療效果，這種差異即病人對哮喘藥物的個體差異是由遺傳差異所造成的不同個體對藥物的活化、代謝、清除方面的差異所決定的。在哮喘的相關(guān)基因研究中，白三烯受體基因目前研究較少。由于不同種族的CysLTs基因型有其獨特的遺傳特征及

4、分布特點，因此目前尚不能肯定CysLTs的變異與我國哮喘及其臨床表型以及白三烯受體拮抗劑反應(yīng)性之間的關(guān)系，因此很有必要分析我國漢族哮喘與非哮喘患兒以及不同家族史患兒CysLTs的多態(tài)性分布頻率，進行多態(tài)性與哮喘表型的相關(guān)研究，并進一步評價CysLTs多態(tài)性與白三烯受體拮抗劑藥物孟魯司特治療反應(yīng)性的關(guān)系。 第一部分 白三烯受體基因多態(tài)性與兒童哮喘家族集聚性關(guān)系的研究 目的： 1.研究CysLT1中617G/

5、T(rs28365142)，651-/A(rs34170395)，685-/A(rs35745545)，815C/G(rs17853465)，927T/C(rs320995)五個SNPs基因多態(tài)性在溫州地區(qū)漢族兒童中的分布特征；2.研究上述位點基因多態(tài)性與支氣管哮喘易感性的關(guān)系。3.研究上述位點基因多態(tài)性與過敏性疾病家族集聚性的關(guān)系。 方法： 1.哮喘組為我院2007年4月～2008年11月門診收治的268例哮喘患兒。入

6、選對象均符合2006年全球哮喘防治創(chuàng)議中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)有無特應(yīng)性疾病(包括過敏性哮喘、過敏性鼻炎、濕疹、過敏性皮炎、蕁麻疹、食物藥物過敏及其他過敏性疾病)家族史分為家族特應(yīng)性和無家族特應(yīng)性兩組。對照組為常規(guī)體檢的排除哮喘的163名健康兒童。并隨機分別選取家族特應(yīng)性組父母34對和無家族特應(yīng)性組父母25對為研究對象。2.應(yīng)用DNA直接測序法，測定268例哮喘與163例正常對照以及59對父母CysLT1中617G/T(rs28365142)

7、、651-/A(rs34170395)、685-/A(rs35745545)、815C/G(rs17853465)、927T/C(rs320995)五個SNPs的基因型/單倍體。3.分析CysLT1中617G/T(rs28365142)，651-/A(rs34170395)，685-/A(rs35745545)、815C/G(rs17853465)、927T/C(rs320995)基因多態(tài)性位點與哮喘的關(guān)系。4.分析CysLT1中617

8、G/T(rs28365142)，651-/A(rs34170395)，685-/A(rs35745545)，815C/G(rs17853465)、927T/C(rs320995)基因多態(tài)性位點與過敏性疾病家族集聚性的關(guān)系。 結(jié)論： 1.本研究結(jié)果提示溫州地區(qū)漢族兒童中存在CysLT1927 T/C(rs320995)位點基因多態(tài)性。2.CysLT1927 T/C位點基因多態(tài)性與溫州地區(qū)漢族人群哮喘易感性存在關(guān)聯(lián)，與過敏性

9、疾病的家族集聚性未見關(guān)聯(lián)。3.本研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)溫州地區(qū)漢族兒童存在CysLT1中617G/T(rs28365142)，651-/A(rs34170395)，685-/A(rs35745545)，815C/G(rs17853465)位點基因多態(tài)性。 第二部分 白三烯受體基因多態(tài)性與溫州地區(qū)哮喘兒童臨床表型關(guān)系的研究 目的： 分析CysLT1R中927 T/C位點的基因多態(tài)性與哮喘臨床表型特應(yīng)性體質(zhì)、血清TI

10、gE、D1IgE及哮喘嚴(yán)重程度的關(guān)系。 方法： 1.研究對象為我院2007年4月～2008年11月門診收治的268例哮喘患兒。入選對象均符合2006年全球哮喘防治創(chuàng)議中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。2.應(yīng)用DNA直接測序法確定268例哮喘患兒CysLT1R中927 T/C位點的基因型，并根據(jù)TT、CT、CC3種基因型將其分為三組。3.采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清TIgE、D1IgE，根據(jù)檔案將其按哮喘嚴(yán)重度分級。4.分析三組哮

11、喘臨床特應(yīng)性體質(zhì)、血清TIgE、D1IgE及哮喘嚴(yán)重程度的差異。 結(jié)論： 本研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)溫州地區(qū)漢族兒童CysLT1927 T/C位點基因多態(tài)性與患兒哮喘表型，特應(yīng)質(zhì)、TIgE、D1IgE、病情嚴(yán)重程度相關(guān)聯(lián)。 第三部分 白三烯受體基因多態(tài)性與哮喘兒童治療反應(yīng)性關(guān)系的研究 目的： 評價使用白三烯拮抗劑孟魯司特的哮喘患兒，其CYSLT1R中927 T/C位點的基因多態(tài)性對白三烯受體拮抗劑反

12、應(yīng)性的影響。 方法： 1.從268名哮喘患兒中隨機選取接受白三烯拮抗劑孟魯司特治療的患兒95例作為研究對象(268例為我院2007年4月～2008年11月門診收治的哮喘患兒，入選對象均符合2006年全球哮喘防治創(chuàng)議中的診斷標(biāo)準(zhǔn))。2.應(yīng)用DNA直接測序法確定95例哮喘患兒CysLT1R中927 T/C位點的基因型，并根據(jù)基因型將其分為TT、CT、CC三組。3.監(jiān)測患兒孟魯司特治療期間病情變化，記錄治療前后TIgE、D1I