MS-275選擇性殺傷MKN-45細胞生長的實驗研究.pdf

1、目的:胃癌是我國消化系統(tǒng)常見高發(fā)惡性腫瘤,居癌癥死亡率的第二位。手術(shù)對早期胃癌有較好的療效,但對中晚期的胃癌療效欠佳?；熀头暖煂ξ赴┯行示^低,只能作為輔助治療,因此尋找更有效的治療手段仍是目前胃癌研究的重點之一。近年研究表明組蛋白乙?；腿ヒ阴；c腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors,HDACIs)對多種腫瘤細胞有明顯的抑制作用并誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡,但是否會選擇性殺傷

2、胃癌細胞而不殺傷正常細胞,目前尚不清楚。故此,我們設(shè)計本實驗以胃癌細胞MKN-45、正常胃粘膜細胞GES-1、張氏肝細胞CHANGLIVER為研究對象初步探討去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275體外抑制胃癌細胞MKN-45的作用及相關(guān)的分子機制。
　　研究方法:1)細胞生長曲線:用不同濃度的MS-275處理MKN-45細胞及CHANGLIVER和GES-1細胞,利用WST-1方法研究MS-275處理細胞后的生長情況。2)凋亡檢測:采用

3、流式細胞術(shù)(flow cytometry,FCM)及TUNEL(terminaldeoxynucleotidyl trasferase-mediated end labeling)檢測MS-275處理后胃癌細胞和正常細胞的凋亡變化。3)通過流式細胞儀檢測細胞內(nèi)的DNA含量來研究MS-275處理胃癌細胞后細胞周期發(fā)生的變化。4)利用caspase廣譜抑制劑結(jié)合流式細胞儀分析caspase在胃癌細胞MKN-45凋亡機制中的作用。5) Wes

4、tern Blot檢測MS-275對胃癌細胞促凋亡基因bax、細胞周期抑制基因p21蛋白表達的影響。
　　結(jié)果:1)去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275可明顯抑制胃癌細胞MKN-45的生長,且呈時間和劑量依賴性,但對正常胃粘膜細胞GES-1及張氏肝細胞CHANGLIVER沒有明顯的生長抑制作用。2) MS-275可明顯誘導(dǎo)胃癌細胞MKN-45細胞凋亡,但對正常胃粘膜細胞GES-1及張氏肝細胞CHANGLIVER并不表現(xiàn)出促凋亡作用。3

5、) MS-275可以使胃癌細胞MKN-45周期停滯于G0/G1期。4) Caspase廣譜抑制劑可明顯抑制MS-275對胃癌細胞的凋亡作用,說明MS-275誘導(dǎo)的細胞凋亡是caspase依賴性的。5) Western Blot結(jié)果表明MS-275可增加促凋亡基因bax、細胞周期抑制基因p21的表達。
　　結(jié)論:去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275可明顯抑制胃癌細胞MKN-45的生長并誘導(dǎo)其凋亡,主要作用是通過調(diào)控一些腫瘤相關(guān)基因,但不