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文檔簡介
1、目的:觀察中藥葛根素(purarin)對小鼠D3胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell-D3)肝細(xì)胞定向分化能力的影響及其機(jī)制。
方 法:MTT法檢測不同濃度的葛根素對小鼠胚胎干細(xì)胞能力的影響,篩選合適的濃度用于分化誘導(dǎo)。通過流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法對干細(xì)胞分化的肝細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和RT-PCR技術(shù)觀察肝細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)量,研究葛根素對干細(xì)胞的肝細(xì)胞定向分化能力的影響。并應(yīng)用RT-PCR技術(shù)觀察轉(zhuǎn)錄因子BMP4/BMP2的表達(dá)
2、量研究葛根素影響胚胎干細(xì)胞的肝細(xì)胞定向分化能力的機(jī)制。
結(jié) 果:小鼠D3胚胎干細(xì)胞可分化為平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和肝細(xì)胞等多種細(xì)胞類型。MTT結(jié)果顯示,葛根素顯著促進(jìn)mES-D3細(xì)胞的能力。最低有效濃度為0.1μM,最大有效濃度為10μM。100μM的葛根素顯著提高甲胎蛋白和白蛋白陽性的細(xì)胞數(shù),并且甲胎蛋白和白蛋白在mRNA的表達(dá)水平均升高。100μM葛根素將小鼠胚胎干細(xì)胞分化過程中BMP4和BMP2表達(dá)高峰由
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