網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化及其促進(jìn)卵巢癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化及其促進(jìn)卵巢癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究姓名：唐慧娟申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：王澤華201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文第二部分第二部分網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化機(jī)制網(wǎng)膜成纖維細(xì)胞的活化機(jī)制目的目的探討網(wǎng)膜組織CAFs的來源及發(fā)生活化的機(jī)制。方法方法1.正常成纖維細(xì)胞（nmalfibroblasts，NFs）與EOC細(xì)胞株SKOV3OVCAR3CAOV3ES2共培養(yǎng)1

2、5天后，取NFs做PCR、Westernblot和免疫熒光，檢測αSMA的表達(dá)和SMAD2的磷酸化；用EdU增殖實(shí)驗(yàn)檢測其增殖水平。2.用不同濃度的轉(zhuǎn)化生長因子β1（transfminggrowthfactβ1，TGFβ1）處理NFs2小時(shí)至2天后，取NFs做PCR、Westernblot檢測αSMA的表達(dá)和SMAD2的磷酸化水平；用EdU增殖實(shí)驗(yàn)檢測其增殖水平。3.用TGFβ1受體抑制劑（A8301）處理NFs，再與SKOV3細(xì)胞共培

3、養(yǎng)或外源性TGFβ1處理，取NFs做PCR、Westernblot檢測αSMA的表達(dá)和SMAD2的磷酸化；用EdU增殖實(shí)驗(yàn)檢測其增殖水平。結(jié)果結(jié)果1.與各種EOC細(xì)胞株共培養(yǎng)4天后，NFs中αSMA表達(dá)量均增加（P0.05），增殖細(xì)胞數(shù)增多（P0.05）。2.用TGFβ1處理NFs2天后，NFs表達(dá)αSMA增多，磷酸化SMAD2增多，并且有劑量依賴性（P0.001）。增殖細(xì)胞數(shù)也增多（P=0.002）。3.用A8301處理NFs可以減弱