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1、目的：研究高糖在體外對(duì)大鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞的功能的影響及其分子機(jī)制，為糖尿病外周血管病變提供新的治療靶點(diǎn)。
方法：密度梯度離心法獲取大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞，EGM-2培養(yǎng)，熒光顯微鏡鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)攝取Dil-ac-LDL，結(jié)合UEA-1lectin雙陽(yáng)性，細(xì)胞免疫熒光VEGFR-2+，CD133+。收集貼壁細(xì)胞并加入不同濃度葡萄糖使培養(yǎng)液終濃度分別為11.1mmol/1、33.3mmol/l、55.5mmol/l
2、。觀(guān)察不同葡萄糖濃度下骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖、遷移和體外血管生成能力的變化，采用westernblot法檢測(cè)小凹蛋白Caveolin-1和eNOS蛋白水平的變化；RT-PCR檢測(cè)Caveolin-1和eNOS的RNA濃度的變化，NO檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基中NO的水平。
結(jié)果：隨著培養(yǎng)液中葡萄糖濃度的增高，骨髓來(lái)源的EPCs的增殖、遷移、成血管能力都逐漸減弱。Caveolin-1mRNA和蛋白濃度逐漸上升；eNOSmRN
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