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文檔簡介
1、目的：探討肝細(xì)胞生長因子（HGF)及其受體c-Met對(duì)大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs）遷移能力的影響及其機(jī)制。
方法：提取、培養(yǎng)和鑒定大鼠骨髓 EPCs；重組腺病毒載體介導(dǎo)c-Met基因轉(zhuǎn)染EPCs，運(yùn)用Real-time PCR、Western blot和CCK8分別檢測c-Met的表達(dá)和細(xì)胞增殖；分別用0、5、10、20和50ng/mL HGF處理Ad-c-Met-EPCs，并通過Transwell遷移系統(tǒng)檢測Ad-c-Me
2、t-EPCs的遷移能力；選取適宜濃度的 HGF處理 EPCs、Ad-GFP-EPCs和Ad-c-Met-EPCs，并設(shè)置 PBS對(duì)照組和磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑LY294002組（同時(shí)加入HGF和10mg/mL的LY294002），通過Transwell遷移系統(tǒng)和 Western blot分別檢測各組細(xì)胞的遷移能力和 Akt、P-Akt的表達(dá)情況。
結(jié)果：①Ad-c-Met-EPCs中c-Met基因與蛋白均為高表達(dá)(P＜0.0
3、5)。②c-Met基因?qū)PCs的增殖無明顯影響。③HGF在0-50ng/mL范圍內(nèi)呈濃度依賴性促進(jìn)Ad-c-Met-EPCs遷移。④HGF+Ad-c-Met-EPCs組的遷移能力和 P-Akt的表達(dá)顯著高于對(duì)照組、HGF+EPCs組、HGF+Ad-GFP-EPCs組和 HGF+ LY294002+Ad-c-Met-EPCs組(P＜0.05)。
結(jié)論： HGF/c-Met能夠顯著提高EPCs的遷移能力；HGF/c-Met可能通
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