黃曲霉毒素B1對雛雞空腸黏膜細胞增殖與凋亡的影響及亞硒酸鈉對其作用的研究.pdf

1、AFB1嚴重影響人和動物的健康，如急性中毒、營養(yǎng)障礙、免疫抑制和誘發(fā)癌變，并且對養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經濟損失。目前關于硒拮抗AFB1對機體的毒性作用逐漸引起人們的重視，并取得了一定的研究成果，但有關AFB1對禽類消化道尤其是空腸細胞增殖和凋亡方面的毒性作用以及硒對其解毒作用還未見報道。
　　本研究采用組織病理學、形態(tài)計量學、免疫組化、流式細胞術及熒光定量PCR方法研究黃曲霉毒素B1對雛雞空腸黏膜細胞增殖與凋亡的損傷及亞硒酸鈉對其的保護

2、作用。試驗選用240只1日齡艾維茵肉雞健雛，隨機分為4組，每組60只，分別飼喂對照組（硒含量為0.332mg/kg）日糧、AFB1組(0.3mg/kg AFB1)日糧、+Se組（在對照組日糧中添加亞硒酸鈉為硒源的0.4mg/kg硒，共0.732mg硒）日糧、AFB1+Se組（在AFB1組日糧中添加以亞硒酸鈉為硒源的0.4mg/kg硒，共0.732mg硒）日糧共21天。其結果如下:
　　AFB1組空腸主要組織學變化為:7、14和21

3、日齡絨毛高度顯著低于對照組(P＜0.01)，7和14日齡的隱窩深度明顯高于對照組(P＜0.01)，7和14日齡隱窩深度/絨毛高度比值明顯低于對照組（P＜0.01）;此外，在7和14日齡時，AFB1組空腸絨毛尖部部分上皮細胞脫落，固有膜裸露。免疫組化檢測顯示在7和14日齡時，AFB1組空腸黏膜PCNA陽性細胞數(shù)量顯著低于對照組(P＜0.01)，而在7、14和21日齡，AFB1組空腸黏膜TUNEL陽性細胞數(shù)量顯著高于對照組(P＜0.01)。

4、流式細胞術檢測結果顯示，和對照組相比，AFB1組7和14日齡時G0/G1期空腸黏膜細胞百分率明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)，G2/M期細胞百分率明顯升高(P＜0.01)，S期細胞百分率未出現(xiàn)明顯差異(P＞0.05)。熒光定量PCR檢測結果顯示為在7、14和21日齡，AFB1組空腸黏膜細胞的Bax和Caspase-3 mRNA表達量顯著高于對照組(P＜0.01)，而Bcl-2 mRNA表達量和Bcl-2/Bax比值明顯低于對照組(

5、P＜0.01或P＜0.05)。
　　+ Se組中各項檢測指標與對照組比較（P＞0.05），總體上無顯著性差異，但14日齡時，絨毛高度顯著高于對照組(P＜0.05);7日齡時，G0/G1期細胞百分率顯著高于對照組(P＜0.01);7和14日齡時，Bax mRNA表達量明顯低于對照組(P＜0.05)，7日齡時，Bcl-2 mRNA表達量顯著高于對照組（P＜0.01）。AFB1+ Se組空腸組織學與對照組間無明顯差異，但7和14日齡絨毛

6、高度和絨毛高度/隱窩深度比值顯著高于AFB1組(P＜0.01)，隱窩深度明顯低于AFB1組(P＜0.01)。AFB1+ Se組PCNA陽性細胞數(shù)量與對照組間無顯著差異(P＞0.05)，但明顯多于AFB1組(P＜0.01);而在7、14和21日齡時，AFB1+ Se組TUNEL陽性細胞數(shù)顯著多于對照組(P＜0.01)，而少于AFB1組(P＜0.01)。7日齡時AFB1+ Se組G0/G1期細胞百分率顯著低于對照組（P＜0.01），S期細胞

7、百分率明顯高于對照組(P＜0.05);7日齡和14日齡時，AFB1+Se組G0/G1期細胞百分率明顯高于AFB1組(P＜0.01或P＜0.05)，而G2/M期細胞百分率明顯低于AFB1組(P＜0.01)，但AFB1+Se組S期細胞百分率與AFB1組間無顯著差異(P＞0.05)。AFB1+ Se組的Caspase-3 mRNA表達量明顯高于對照組(P＜0.01)，而顯著低于AFB1組(P＜0.01或P＜0.05);Bcl-2 mRNA表達

8、量和Bcl-2/Bax比值顯著低于對照組(P＜0.01)，而明顯高于AFB1組（P＜0.01）。
　　綜上所述，日糧中0.3mg/kg AFB1可致雛雞空腸絨毛受損、組織結構改變，細胞增殖降低，細胞凋亡增強。而日糧中0.732mg/kg硒可保護AFB1所致空腸組織結構的損傷。其可能的機制是:硒上調Bcl-2 mRNA和下調Bax及Caspase-3mRNA的表達，改善細胞G0/G1期阻滯和增強PCNA表達從而抑制空腸黏膜細胞凋亡和