黃曲霉毒素B1對雛雞空腸黏膜細(xì)胞增殖與凋亡的影響及亞硒酸鈉對其作用的研究.pdf

1、AFB1嚴(yán)重影響人和動物的健康，如急性中毒、營養(yǎng)障礙、免疫抑制和誘發(fā)癌變，并且對養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。目前關(guān)于硒拮抗AFB1對機體的毒性作用逐漸引起人們的重視，并取得了一定的研究成果，但有關(guān)AFB1對禽類消化道尤其是空腸細(xì)胞增殖和凋亡方面的毒性作用以及硒對其解毒作用還未見報道。
　　本研究采用組織病理學(xué)、形態(tài)計量學(xué)、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)及熒光定量PCR方法研究黃曲霉毒素B1對雛雞空腸黏膜細(xì)胞增殖與凋亡的損傷及亞硒酸鈉對其的保護

2、作用。試驗選用240只1日齡艾維茵肉雞健雛，隨機分為4組，每組60只，分別飼喂對照組（硒含量為0.332mg/kg）日糧、AFB1組(0.3mg/kg AFB1)日糧、+Se組（在對照組日糧中添加亞硒酸鈉為硒源的0.4mg/kg硒，共0.732mg硒）日糧、AFB1+Se組（在AFB1組日糧中添加以亞硒酸鈉為硒源的0.4mg/kg硒，共0.732mg硒）日糧共21天。其結(jié)果如下:
　　AFB1組空腸主要組織學(xué)變化為:7、14和21

3、日齡絨毛高度顯著低于對照組(P＜0.01)，7和14日齡的隱窩深度明顯高于對照組(P＜0.01)，7和14日齡隱窩深度/絨毛高度比值明顯低于對照組（P＜0.01）;此外，在7和14日齡時，AFB1組空腸絨毛尖部部分上皮細(xì)胞脫落，固有膜裸露。免疫組化檢測顯示在7和14日齡時，AFB1組空腸黏膜PCNA陽性細(xì)胞數(shù)量顯著低于對照組(P＜0.01)，而在7、14和21日齡，AFB1組空腸黏膜TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量顯著高于對照組(P＜0.01)。

4、流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，和對照組相比，AFB1組7和14日齡時G0/G1期空腸黏膜細(xì)胞百分率明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)，G2/M期細(xì)胞百分率明顯升高(P＜0.01)，S期細(xì)胞百分率未出現(xiàn)明顯差異(P＞0.05)。熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示為在7、14和21日齡，AFB1組空腸黏膜細(xì)胞的Bax和Caspase-3 mRNA表達(dá)量顯著高于對照組(P＜0.01)，而Bcl-2 mRNA表達(dá)量和Bcl-2/Bax比值明顯低于對照組(

5、P＜0.01或P＜0.05)。
　　+ Se組中各項檢測指標(biāo)與對照組比較（P＞0.05），總體上無顯著性差異，但14日齡時，絨毛高度顯著高于對照組(P＜0.05);7日齡時，G0/G1期細(xì)胞百分率顯著高于對照組(P＜0.01);7和14日齡時，Bax mRNA表達(dá)量明顯低于對照組(P＜0.05)，7日齡時，Bcl-2 mRNA表達(dá)量顯著高于對照組（P＜0.01）。AFB1+ Se組空腸組織學(xué)與對照組間無明顯差異，但7和14日齡絨毛

6、高度和絨毛高度/隱窩深度比值顯著高于AFB1組(P＜0.01)，隱窩深度明顯低于AFB1組(P＜0.01)。AFB1+ Se組PCNA陽性細(xì)胞數(shù)量與對照組間無顯著差異(P＞0.05)，但明顯多于AFB1組(P＜0.01);而在7、14和21日齡時，AFB1+ Se組TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)顯著多于對照組(P＜0.01)，而少于AFB1組(P＜0.01)。7日齡時AFB1+ Se組G0/G1期細(xì)胞百分率顯著低于對照組（P＜0.01），S期細(xì)胞

7、百分率明顯高于對照組(P＜0.05);7日齡和14日齡時，AFB1+Se組G0/G1期細(xì)胞百分率明顯高于AFB1組(P＜0.01或P＜0.05)，而G2/M期細(xì)胞百分率明顯低于AFB1組(P＜0.01)，但AFB1+Se組S期細(xì)胞百分率與AFB1組間無顯著差異(P＞0.05)。AFB1+ Se組的Caspase-3 mRNA表達(dá)量明顯高于對照組(P＜0.01)，而顯著低于AFB1組(P＜0.01或P＜0.05);Bcl-2 mRNA表達(dá)

8、量和Bcl-2/Bax比值顯著低于對照組(P＜0.01)，而明顯高于AFB1組（P＜0.01）。
　　綜上所述，日糧中0.3mg/kg AFB1可致雛雞空腸絨毛受損、組織結(jié)構(gòu)改變，細(xì)胞增殖降低，細(xì)胞凋亡增強。而日糧中0.732mg/kg硒可保護AFB1所致空腸組織結(jié)構(gòu)的損傷。其可能的機制是:硒上調(diào)Bcl-2 mRNA和下調(diào)Bax及Caspase-3mRNA的表達(dá)，改善細(xì)胞G0/G1期阻滯和增強PCNA表達(dá)從而抑制空腸黏膜細(xì)胞凋亡和