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1、目的:研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)對(duì)SNU-601/WT胃癌細(xì)胞抗增殖作用及其與細(xì)胞周期相關(guān)蛋白-c-myc和突變型p53蛋白表達(dá)的相關(guān)性。 方法:實(shí)驗(yàn)分為兩組;即對(duì)照組:不加TGF-β1的SNU-601/WT細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)組:加10ng/mLTGF-β1的SNU-601/WT細(xì)胞,每組細(xì)胞分別培養(yǎng)24、48和72h。倒置顯微鏡觀察SNU-601/WT胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)情況,
2、應(yīng)用MTT方法檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間段的細(xì)胞生存率,并用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)及Westernblotting技術(shù)檢測(cè)c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果:MTT結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組的SNU-601/WT細(xì)胞生存率逐漸下降,具有濃度和時(shí)間依賴性,與對(duì)照組相比生存率明顯降低(P<0.001)。倒置顯微鏡觀察,對(duì)照組SNU-601/WT細(xì)胞增殖隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)明顯增強(qiáng),而用10ng/mLTGF-β1處理的實(shí)驗(yàn)組SNU-601/WT細(xì)胞
3、增殖在各時(shí)間段與對(duì)照組相比明顯減弱。免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果,在24、48和72h時(shí)對(duì)照組細(xì)胞c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)均呈強(qiáng)陽性,而實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)逐漸降低,具有時(shí)間依賴性。Westernblotting結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組SNU-601/WT細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)水平逐漸降低,各時(shí)間段與對(duì)照組相比具有顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論:TGF-β1可濃度和時(shí)間依賴性抑制胃癌細(xì)胞SN
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