基于碲化鎘量子點(diǎn)探針的胃癌細(xì)胞株MGC80-3的體外免疫熒光成像研究.pdf

1、目的:制作近紅外靶向碲化鎘(CdTe)量子點(diǎn)(Quantum Dots，QDs)探針對人胃癌細(xì)胞株MGC80-3進(jìn)行特異性免疫熒光成像。
　　方法:將人胃癌特異性抗原TAG-72(Tumor-associated Glycoprotein72)的單克隆抗體CC49與碲化鎘量子點(diǎn)結(jié)合，制成具有特異性標(biāo)記功能的靶向碲化鎘量子點(diǎn)探針。采用透射電鏡觀察、熒光光譜分析以及高效液相色譜分析(HPLC)等方法對制成的樣品特性進(jìn)行研究分析。采用蛋

2、白質(zhì)印跡(Western Blot)和免疫組織化學(xué)法對細(xì)胞株表面的抗原TAG-72進(jìn)行檢測。采用直接免疫熒光法，通過靶向碲化鎘量子點(diǎn)探針與胃癌表面抗原TAG-72的特異性結(jié)合對胃癌細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光成像。
　　結(jié)果:透射電鏡成像顯示靶向量子點(diǎn)探針直徑較量子點(diǎn)直徑增加了僅約0.3nm。光譜分析顯示靶向碲化鎘量子點(diǎn)探針發(fā)射光光譜與未結(jié)合抗體的碲化鎘量子點(diǎn)發(fā)射光光譜基本相同。高效液相色譜分析顯示實(shí)驗(yàn)合成了的靶向碲化鎘量子點(diǎn)探針溶液樣品中含

3、有兩種物質(zhì)，即靶向碲化鎘量子點(diǎn)和少量游離的CC49單克隆抗體。Western Blot和免疫組織化學(xué)法檢測顯示人胃癌細(xì)胞株MGC80-3表面存在特異性抗原TAG-72，而正常胃粘膜上皮細(xì)胞株GES-1細(xì)胞表面未檢測到抗原TAG-72。胃癌細(xì)胞免疫熒光成像顯示實(shí)驗(yàn)中制作的靶向碲化鎘量子點(diǎn)能夠與胃癌細(xì)胞特異性結(jié)合并顯像。
　　結(jié)論:通過本項(xiàng)研究可以制作一種能夠特異性結(jié)合胃癌細(xì)胞的靶向碲化鎘量子點(diǎn)探針，在體外能夠?qū)ξ赴┘?xì)胞株進(jìn)行特異性免