C225聯(lián)合多西他賽在人胃癌細胞株MGC803及BGC823中的體外研究.pdf

1、目的： 1、通過體外觀察C225及與細胞毒性藥物多西他賽聯(lián)合對胃癌細胞株MGC803和BGC823增殖的影響，評估藥物聯(lián)合效應并探討最佳聯(lián)合方案。 2、通過觀察C225及與多西他賽聯(lián)合對胃癌細胞生長周期的影響及相關蛋白表達的變化，探討最佳聯(lián)合順序方案的作用機理。 方法： 將MGC803及BGC823人胃癌細胞株于37℃、5％CO2條件下進行培養(yǎng)。1、待細胞呈對數生長，接種于96孔培養(yǎng)板，設空白對照組、C2

2、25組、多西他賽組及C225+多西他賽聯(lián)合組，經不同給藥濃度及順序處理后應用MTT法檢測C225及與多西他賽聯(lián)用對細胞增殖的影響，并計算兩藥聯(lián)合效應，找出最佳聯(lián)合給藥順序：2、將細胞接種于6孔板，設置空白對照組、C225組及最佳的聯(lián)合給藥濃度及順序處理組，應用流式細胞術檢測細胞凋亡周期。3、以Western-Blotting蛋白免疫印記法，分析最佳的聯(lián)合給藥濃度及順序處理前后EGFR及其下游分子p-38MAPK、p-AKT表達的變化情況

3、。 結果： 1、MTT比色結果顯示：C225單藥作用，隨著給藥濃度從0.1ug/ml-1000ug/ml遞增，其對人胃癌MGC803及BGC823細胞株的抑制作用呈現(xiàn)逐漸增強的趨勢，但未顯出明顯的量-效關系；多西他賽單獨作用對人胃癌MGC803及BGC823細胞株的抑制呈明顯量-效關系；C225與多西他賽聯(lián)合作用時，能在一定程度上增加多西他賽的腫瘤抑制作用；多西他賽先于C225給藥的序貫給藥優(yōu)于其它給藥順序。 2

4、、流式細胞術分析結果提示：C225誘導人胃癌MGC803及BGC823細胞株G0/G1期阻滯，S期的細胞比例減少，從而促進腫瘤細胞的凋亡。 3、Western-Blotting檢測結果顯示：C225與多西他賽序貫聯(lián)合作用時，能下調人胃MGC803及BGC823細胞株EGFR信號通路相關蛋白p-38MAPK、p-AKT的表達從而達到抑制細胞增殖作用。 結論： 1、C225與多西他賽聯(lián)合作用時，在一定程度上可增強其對

5、人胃癌MGC803、BGC823細胞株的生長抑制效應；多西他賽先于C225給藥的序貫給藥順序優(yōu)于其他聯(lián)合順序。 2、C225 與多西他賽序貫順序作用的機制可能為：多西他賽可上調EGFR表達水平，增強C225對EGFR信號傳導通路及其通路下游的相關蛋白p-38MAPK、p-AKT的表達的抑制，進而抑制細胞增殖，增加細胞G0/G1期阻滯，促進腫瘤細胞的凋亡。 3、C225在人胃癌細胞中的研究為C225單獨或與其他細胞毒性藥物聯(lián)合用于