鹽酸小檗堿、右旋檸檬烯對(duì)人胃癌細(xì)胞株MGC-803的體外聯(lián)合作用評(píng)價(jià).pdf

1、目的：體外觀察鹽酸小檗堿(簡稱小檗堿)、右旋檸檬烯(簡稱檸檬烯)單獨(dú)與聯(lián)合對(duì)人胃癌細(xì)胞株MGC-803抗癌效應(yīng)，并探討可能的機(jī)制。 方法：小檗堿和檸檬烯單獨(dú)與聯(lián)合作用MGC-803細(xì)胞24至48 h。采用MTT法檢測藥物對(duì)胃癌細(xì)胞生長的抑制作用，利用Chou和Talalay法計(jì)算兩種藥物的合用指數(shù)(CI)以及藥物減少指數(shù)(DRI)；流式細(xì)胞術(shù)和激光共聚焦顯微鏡用于檢測其對(duì)細(xì)胞周期的分布、凋亡率、胞內(nèi)活性氧自由基的生成、線粒體膜電

2、位，以及Bcl-2、Caspase-3表達(dá)等的影響。 結(jié)果： 1.小檗堿與檸檬烯對(duì)MGC-803細(xì)胞的生長均有顯著的抑制作用，并且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。兩藥以48h作用的中效劑量之比即1:4進(jìn)行聯(lián)合，當(dāng)合用劑量為0.1~1 mM作用24 h以及合用劑量為0.04~0.1 mM作用48h時(shí)，CI<1，小檗堿的DRl為1.8~3.8，檸檬烯的DRI為2.1～5.4，藥物聯(lián)合具有協(xié)同作用。 2.小檗堿使MGC-803細(xì)胞阻

3、滯于Go/G1期，檸檬烯單用與聯(lián)合則導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯于Go/G1期或(和)G2/M期。聯(lián)合藥物作用36h和48h的細(xì)胞凋亡率分別達(dá)到26％和29％，相同時(shí)間兩種藥物單獨(dú)使用時(shí)的凋亡率相比差異明顯(p<0.05)，作用24h時(shí)與檸檬烯單獨(dú)作用相比差異并不顯著。 3.小檗堿與檸檬烯單獨(dú)或聯(lián)合均能刺激MGC-803細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS的生成，線粒體膜電位△Ψm降低，下調(diào)Bcl-2的表達(dá)，上調(diào)Caspase-3的表達(dá)，且藥物聯(lián)合與單獨(dú)用藥

4、時(shí)相比對(duì)MGC-803細(xì)胞作用更加顯著。 結(jié)論： 1.小檗堿與檸檬烯單獨(dú)或聯(lián)合對(duì)MGC-803細(xì)胞均有抑制作用。在一定劑量范圍內(nèi)，兩藥合用具有協(xié)同作用。 2.小檗堿與檸檬烯聯(lián)合對(duì)抗MGC-803細(xì)胞時(shí)，檸檬烯也許對(duì)細(xì)胞周期的影響起主要作用。兩藥的聯(lián)合能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，但需要經(jīng)過一定時(shí)間的作用才能顯著提高細(xì)胞凋亡率。 3.兩藥的聯(lián)用可能通過刺激ROS的生成，使線粒體功能損傷以及調(diào)控凋亡蛋白的表達(dá)來誘導(dǎo)凋亡以