心肌缺血對大鼠心肌血管內(nèi)皮細胞生長因子的影響及抑郁和活血化瘀類中成藥干預的實驗研究.pdf

1、目的：觀察大鼠缺血心肌中毛細血管新生情況，及血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)的表達變化，分析中藥（復方丹參滴丸、腦心通等）對抑郁狀態(tài)下大鼠缺血心肌血管新生的影響并探討其機制。
　　方法：通過采用慢性不可預計溫和應(yīng)激刺激構(gòu)建抑郁大鼠模型、冠狀動脈左前降支結(jié)扎法建立心肌缺血模型，將實驗對象SD大鼠隨機分為12組建立模型（分別為：A組—抑郁手術(shù)丹參滴丸組、B組—抑郁手術(shù)腦心通組、C組—抑郁手術(shù)生理鹽水中、D組—手術(shù)非抑郁丹參滴丸組、E組

2、—手術(shù)非抑郁腦心通組、F組—手術(shù)非抑郁生理鹽水中組、G組—非抑郁手術(shù)丹參滴丸組、H組—非抑郁手術(shù)腦心通組、I組—非抑郁手術(shù)生理鹽水組、J組—非抑郁手術(shù)丹參滴丸組、K組—非抑郁手術(shù)腦心通組、M組—非抑郁手術(shù)生理鹽水組）。待各組模型建好后第4天開始給大鼠灌胃藥品，10天后取大鼠缺血心肌及其周邊心肌組織行常規(guī)HE染色觀察缺血心肌組織學改變并測量心肌梗死面積，免疫組化檢測大鼠缺血心肌梗死邊緣區(qū)中 VEGF蛋白質(zhì)表達，原位雜交方法檢測缺血心肌梗死

3、邊緣區(qū)中 mRNA的表達并測定微血管密度，RT-PCR對大鼠缺血心肌中VEGFmRNA進行定量測定。
　　結(jié)果：①肉眼觀察:手術(shù)組均可見心臟結(jié)扎部分以下左心室心肌組織顏色蒼白，形態(tài)不規(guī)則，左心室前壁梗死區(qū)變薄，心肌梗死顏色、蒼白區(qū)范圍、大小不一，程度以C組最為明顯。假手術(shù)組未見明顯心肌梗死。②HE染色：M組未見明顯病理改變，J、K組病理形態(tài)改變和M組相似。G.H組同I組比較，心肌細胞變性壞死炎癥反應(yīng)明顯減輕，非梗死區(qū)心肌細胞的形態(tài)

4、、結(jié)構(gòu)都有所恢復。梗死模型組心肌病理改變相似，均明顯加重，以 C、F組病變程度最為明顯。A.B組同 C組，D.E組同F(xiàn)組。③心肌梗死面積測定示：給予不同藥物治療、抑郁及非抑郁、手術(shù)及假手術(shù)組大鼠心肌梗死面積均不同，差異具有統(tǒng)計學效應(yīng)（P＜0.05），給予中藥（復方丹參滴丸、腦心通）后大鼠心肌梗死。④面積較給予生理鹽水時明顯縮小，抑郁大鼠較非抑郁大鼠心肌梗死面積擴大，手術(shù)組較假手術(shù)組大鼠心肌梗死面積明顯擴大。手術(shù)與抑郁情況之間交互作用顯著

5、（P＜0.05），說明手術(shù)情況受抑郁情況的影響，抑郁假手術(shù)組較非抑郁假手術(shù)組大鼠心肌梗死面積增加。⑤VEGF蛋白表達示：給予不同藥物治療、抑郁及非抑郁、手術(shù)及假手術(shù)組大鼠心肌組織VEGF蛋白表達均不同，差異具有統(tǒng)計學效應(yīng)（P＜0.05），給予中藥（復方丹參滴丸、腦心通）后較給予生理鹽水時，抑郁較非抑郁，手術(shù)組較假手術(shù)組大鼠心肌組織VEGF蛋白表達均明顯增多。給藥與手術(shù)情況之間、給藥與抑郁情況之間交互作用顯著P＜0.05，說明手術(shù)情況及抑

6、郁情況均受給藥情況的影響。給藥后手術(shù)及假手術(shù)組、抑郁及非抑郁組大鼠心肌組織VEGF蛋白表達均增加。⑥原位雜交方法檢測缺血心肌梗死邊緣區(qū)中VEGFmRNA表達示：給予不同藥物治療、抑郁及非抑郁、手術(shù)及假手術(shù)組缺血心肌梗死邊緣區(qū)中VEGFmRNA均不同，差異具有統(tǒng)計學效應(yīng)（P＜0.05），給予中藥（復方丹參滴丸、腦心通）后較給予生理鹽水時，抑郁較非抑郁，手術(shù)組較假手術(shù)組大鼠缺血心肌梗死邊緣區(qū)中VEGFmRNA表達均明顯增多。手術(shù)情況與抑郁情

7、況之間交互作用顯著P＜0.05，說明手術(shù)情況受抑郁情況的影響。手術(shù)組大鼠非抑郁時VEGF mRNA表達相對減少，抑郁時相對增多。⑦平均微血管密度測定示：給予不同藥物治療、抑郁及非抑郁、手術(shù)及假手術(shù)組大鼠缺血心肌梗死邊緣區(qū)中平均微血管密度均不同，差異具有統(tǒng)計學效應(yīng)（P＜0.05），給予中藥（復方丹參滴丸、腦心通）后較給予生理鹽水時，抑郁較非抑郁，手術(shù)組較假手術(shù)組大鼠缺血心肌梗死邊緣區(qū)中平均微血管密度表達均明顯增多。給藥與手術(shù)情況之間、給藥

8、與抑郁情況之間、手術(shù)情況與抑郁情況之間交互作用均顯著 P＜0.05，說明三種因素之間，兩兩相互影響。手術(shù)組給予生理鹽水較給予中藥平均微血管密度減少，手術(shù)非抑郁組較手術(shù)抑郁組平均微血管密度減少。⑧RT-PCR測 VEGF mRNA表達示：給予不同藥物治療、抑郁及非抑郁、手術(shù)及假手術(shù)組大鼠缺血心肌VEGF mRNA表達均不同，差異具有統(tǒng)計學效應(yīng)（P＜0.05），給予中藥（復方丹參滴丸、腦心通）后較給予生理鹽水時，抑郁較非抑郁，手術(shù)組較假手術(shù)

9、組大鼠缺血心肌VEGF mRNA表達均明顯增多。手術(shù)情況與抑郁情況之間交互作用顯著 P＜0.05，兩者相互影響。手術(shù)抑郁組大鼠缺血心肌VEGF mRNA表達較手術(shù)非抑郁組大鼠增多。
　　結(jié)論：①缺血、藥物及抑郁因素均可影響大鼠心肌梗死面積及微血管密度。手術(shù)組大鼠心肌供血不足，組織缺氧，可代償性的出現(xiàn)微血管新生增多，抑郁在一定程度上影響缺血心肌微血管新生，促使缺血心肌微血管生成增加，但這是種病理狀態(tài)下代償性的血管新生，發(fā)展過程較慢，