腦紅蛋白基因在缺氧缺血性腦損傷多臟器中的表達(dá)及其機(jī)制的探討.pdf

1、新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)多由圍產(chǎn)期嚴(yán)重的窒息缺氧造成，HIE患兒多留有不同程度的后遺癥。近年來，因窒息缺氧導(dǎo)致的HIE及伴隨的多系統(tǒng)器官損傷日益受到重視。2000年新發(fā)現(xiàn)的腦紅蛋白(NGB)是繼脊椎動物血紅蛋白與肌紅蛋白之后所發(fā)現(xiàn)的第三類攜氧球蛋白，具有可逆性結(jié)合、運(yùn)輸及貯存氧的主要生物學(xué)功能，在缺氧缺血性損傷時(shí)發(fā)揮缺氧誘導(dǎo)的神經(jīng)保護(hù)因子作用。本文通過制備新生豬缺氧缺血性腦病模型，造成一定程度的缺氧缺血性腦損傷(HIBD)，利用半

2、定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測了模型后不同時(shí)間的新生豬腦、腎上腺、心臟、腎臟及肝臟NGBmRNA的表達(dá)變化情況。 目的1.成功建立新生豬缺氧缺血性腦病模型，觀察其神經(jīng)行為改變及組織損傷情況。 2.觀察HIBD后不同時(shí)間的腦組織NGBmRNA的表達(dá)變化。 3.檢測對照組新生豬多臟器組織中有無NGBmRNA的表達(dá)。 4.觀察HIBD后不同時(shí)間的多臟器組織NGBmRNA的表達(dá)變化。

3、方法1.利用改良的Rice法，以新生豬為實(shí)驗(yàn)動物制備缺氧缺血性腦病模型。 2.利用半定量RT-PCR技術(shù)，分別檢測對照組新生豬及HIBD后0、15、30、60、120、360min時(shí)腦、腎上腺、心臟、腎臟及肝臟NGBmRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果1.HIBD組新生豬死亡率5.26％，存活者中100％出現(xiàn)神經(jīng)行為異常，缺血側(cè)腦組織病理檢查(大體形態(tài)、顯微結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu))發(fā)現(xiàn)較為一致的病理變化，在HIBD后360min最為顯著。

4、海馬出現(xiàn)病理變化較皮層早。 2.新生豬HIBD后0min(即刻)腦組織中NGBmRNA表達(dá)僅輕微升高，15min時(shí)繼續(xù)升高，30min時(shí)NGBmRNA快速增加達(dá)到高峰，至60min時(shí)已迅速降低，以后至360min時(shí)仍保持在此低水平。 3.對照組新生豬的心臟、腎臟、腎上腺、肝臟等臟器組織中亦有NGBmRNA的表達(dá)，不同組織中NGBmRNA表達(dá)有差異，表達(dá)量依次為腎臟＜心臟＜肝臟＜腎上腺＜腦。 4.新生豬HIE模型后

5、各臟器組織中NGBmRNA的表達(dá)均有升高或升高趨勢，呈不同的時(shí)相性變化。 結(jié)論1.較成功地制備了新生豬缺氧缺血性腦病模型。 2.新生豬HIBD后30min內(nèi)腦組織NGBmRNA表達(dá)迅速升高，并呈時(shí)相性變化，NGB可能在缺氧缺血性腦損傷的適應(yīng)性調(diào)節(jié)過程中起重要作用，是一種缺氧誘導(dǎo)的內(nèi)源性神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。 3.除腦組織外，在其他組織如腎上腺、心臟、肝臟及腎臟組織中亦有NGBmRNA的表達(dá)。提示NGB基因可能并非神經(jīng)系統(tǒng)