低體積分?jǐn)?shù)氧預(yù)處理對(duì)缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦組織腦紅蛋白變化的影響.pdf

1、新生兒缺氧缺血性腦病(Hypoxic-ischemicbraindamage，HIBD)是導(dǎo)致新生兒傷殘的主要的疾病之一，它的診斷與規(guī)范治療問題仍是國內(nèi)外同道關(guān)注的熱點(diǎn)。目前對(duì)HIBD的防治研究主要集中在谷氨酸受體拮抗劑、NO合成抑制劑、鈣通道阻滯劑、氧自由基清除劑和抑制劑、神經(jīng)節(jié)苷脂、亞低溫、大劑量苯巴比妥，但僅用于實(shí)驗(yàn)性治療，其效果和安全性均存在爭(zhēng)議，因此尋找一種有效而可行的腦保護(hù)途徑十分有必要。 低體積分?jǐn)?shù)氧(低氧)預(yù)處理

2、(Hypoxicpreconditioning，HP)是指一次或多次短暫的輕度缺氧后，觸發(fā)機(jī)體內(nèi)在的防護(hù)機(jī)能，從而對(duì)隨后發(fā)生的嚴(yán)重缺血/缺氧產(chǎn)生防御和保護(hù)作用。HP目前已成為抗缺血/缺氧研究的熱點(diǎn)之一，已經(jīng)被證實(shí)對(duì)腦、心臟、視網(wǎng)膜、肝臟、腎臟以及其他多種器官具有保護(hù)作用，目前關(guān)于腦低氧預(yù)處理現(xiàn)象及其機(jī)制的研究頗多，研究發(fā)現(xiàn)低氧預(yù)處理與缺氧誘導(dǎo)因子、NO、腺苷、興奮性氨基酸、自由基及一些細(xì)胞因子等關(guān)系密切。 腦紅蛋白(Neurog

3、lobin，Ngb)是類似血紅蛋白和肌紅蛋白的一種重要攜氧球蛋白，攜氧球蛋白是一類與呼吸功能密切相關(guān)的蛋白質(zhì)，其共同特性是可以把O2攜帶至有氧代謝的呼吸鏈。Ngb在人和哺乳動(dòng)物的多種組織內(nèi)都有表達(dá)，但主要存在于腦組織和視網(wǎng)膜中，它能夠可逆性地與氧結(jié)合，且與氧有很高的親和力，能夠特異性地釋放氧以供腦組織代謝需要，在神經(jīng)系統(tǒng)氧的攝取、運(yùn)輸和利用等生理過程中起著極其重要的作用。 本實(shí)驗(yàn)從腦缺血損傷發(fā)生的早期入手，研究低氧預(yù)處理對(duì)新生大

4、鼠缺氧缺血性腦損傷時(shí)腦紅蛋白變化的影響，深入探討腦紅蛋白這一蛋白質(zhì)發(fā)現(xiàn)的重要意義。 目的觀察低氧預(yù)處理對(duì)缺氧缺血性腦損傷(HIBD)新生大鼠腦紅蛋白(Ngb)變化的影響，探討低氧預(yù)處理與Ngb的關(guān)系。 方法隨機(jī)將出生7天Wistar大鼠120只分為三組假手術(shù)組(n=20)腦缺血組(HIBD組)(n=50)低氧預(yù)處理后HIBD組(HP后HIBD組)(n=50)。HIBD組和HP后HIBD組在模型建立后1，5，15，30和6

5、0分鐘各個(gè)時(shí)間點(diǎn)再分為五個(gè)亞組，采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎的方法建立HIBD模型，應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)PCR法(RT-PCR)和免疫組化的方法檢測(cè)在低氧預(yù)處理干預(yù)下腦缺氧缺血后NgbmRNA及蛋白質(zhì)在不同時(shí)間的表達(dá)量。 結(jié)果RT-PCR半定量分析：HIBD組NgbmRNA在1，5分鐘時(shí)相對(duì)表達(dá)量(A=目的基因表達(dá)量/內(nèi)參表達(dá)量：1.59±0.20，1.98±0.22)分別高于假手術(shù)組(A：1.52±0.25)(P均<0.05)；1

6、5，30，60分鐘時(shí)表達(dá)下降(A：1.55±0.28，1.52±0.25，1.51±0.24)，與假手術(shù)組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。與HIBD組比較，HP后HIBD組1，5分鐘時(shí)NgbmRNA相對(duì)表達(dá)量增加(A：1.60±0.26，1.99±0.30)，15，30和60分鐘時(shí)下降(A：1.56±0.23，1.53±0.20，1.53±0.27)，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。免疫組化結(jié)果顯示HP后HIBD組Ngb在1

7、，5，15，30，60分鐘平均光密度um(195.0±11.26，202.41±12.2，182.6±15.72，178.22±14.37，164.86±28.99)與HIBD組平均光密度um(195.59±11.59，201.4±13.61，178.09±18.92，173.75±14.3，163.45±18.66)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，與PCR的結(jié)果是一致的。 結(jié)論低氧預(yù)處理對(duì)新生大鼠的腦保護(hù)作用與腦紅蛋白含量