腺病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因轉(zhuǎn)移防治移植血管狹窄的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該文由三篇論文組成.一、攜帶內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因的重組腺病毒載體的構(gòu)建及鑒定.目的:該實(shí)驗(yàn)的目的為能夠?qū)NOS基因高效、穩(wěn)定、安全的轉(zhuǎn)移至血管壁細(xì)胞,而構(gòu)建帶有eNOS基因的復(fù)制所陷型重組腺病毒載體.目前,國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)帶有eNOS基因的重組腺病毒載體構(gòu)建的報(bào)道.結(jié)論:采用磷酸鈣-DNA沉淀法將重組質(zhì)粒pCA14-CMV-eNOS和腺病毒拯救質(zhì)粒pBHG10共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,通過(guò)同源重組,生成帶有eNOS基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒載體.

2、經(jīng)形態(tài)學(xué)、病毒DNA酶切、PCR和RT-PCR等方法鑒定,證實(shí)所構(gòu)建的正確性.為血管疾病的基因治療打下基礎(chǔ).二、腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因轉(zhuǎn)移對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用.目的:是用腺病毒介導(dǎo)eNOS基因轉(zhuǎn)移至體外培養(yǎng)的VSMC中,觀察其對(duì)VSMC增殖的抑制作用,以探討冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)后血管再狹窄的基因治療可行性.結(jié)論:腺病毒介導(dǎo)的eNOS工因可以在VSMC中高效的轉(zhuǎn)染表達(dá),并對(duì)VSMC的增殖有明顯的抑制作用.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:抑制VS

3、MC增殖主要是通過(guò)對(duì)細(xì)胞增殖周期阻滯實(shí)現(xiàn)的,而不是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.目前,國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有關(guān)eNOS基因轉(zhuǎn)移抑制VSMC增殖的研究報(bào)告.三、腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因局部轉(zhuǎn)移對(duì)移植血管內(nèi)膜增生的抑制作用.目的:在動(dòng)脈"搭橋"的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?通過(guò)腺病毒載體將eNOS基因轉(zhuǎn)入到靜脈橋中,觀察其在靜脈橋中的表達(dá)和對(duì)新生內(nèi)膜增生的抑制作用,探討eNOS基因轉(zhuǎn)移對(duì)血管橋再狹窄的防治作用.經(jīng)檢索國(guó)內(nèi)外尚無(wú)類(lèi)似研究報(bào)告.結(jié)論:腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因能夠有效