FUT1-FUT4表達(dá)下調(diào)對(duì)A431腫瘤細(xì)胞荷瘤小鼠的血管新生的抑制作用.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室前期工作中利用RNA干擾(RNAi)技術(shù)，構(gòu)建FUT1/FUT4基因的干涉質(zhì)粒(FUT1/FUT4 siRNA)，通過抑制FUT1/FUT4基因的表達(dá)，降低LeY寡糖抗原的合成，利用細(xì)胞培養(yǎng)和建立A431腫瘤細(xì)胞荷瘤小鼠模型，通過體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)，證明：通過注射FUT1/FUT4 siRNA可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。為進(jìn)一步探討siRNA在腫瘤增殖中的分子作用機(jī)制，本論文研究LeY寡糖抗原與腫瘤血管新生的相關(guān)性。 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)

2、因子(VEGF)是促進(jìn)實(shí)體瘤血管發(fā)生和血管新生的重要因子之一，而腫瘤組織的微血管密度(microvessel density，MVD)是反映實(shí)體瘤增殖能力的客觀指標(biāo)。因此本實(shí)驗(yàn)選用VEGF和MVD來評(píng)價(jià)腫瘤血管新生。 本研究采用荷瘤小鼠模型的腫瘤組織，通過RT-PCR、Western blot及間接免疫熒光檢測(cè)方法，檢測(cè)注射FUT1/FUT4 siRNA后對(duì)腫瘤組織中FUT1/FUT4基因和LeY寡糖抗原表達(dá)的情況；通過West

3、ern blot和免疫組織化學(xué)方法，檢測(cè)腫瘤組織中VEGF的表達(dá)；通過CD34免疫組化染色，觀察腫瘤組織中血管新生情況，分析腫瘤組織中MVD值的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：重組FUT1/FUT4干涉質(zhì)?？梢种颇[瘤組織中VEGF的表達(dá)，減少腫瘤血管新生，并且是通過降低腫瘤組織中特異的FUT1/FUT4的表達(dá)而下調(diào)LeY寡糖抗原的合成而發(fā)揮作用的。 通過對(duì)荷瘤小鼠模型中腫瘤組織的研究，重組FUT1/FUT4干涉質(zhì)粒可抑制腫瘤組織的血管新生，