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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文EGF對癌細(xì)胞Colo26、Hep2化療增效作用的研究姓名:耿淑美申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:朱嚴(yán)冰20050301中文摘要然后,用0.25%的胰蛋白酶消化后的Colo26單細(xì)胞懸液(細(xì)胞密度為2x10勺ml)接種于3塊96孔板中,200ul每孔,24h后細(xì)胞貼壁生長,進(jìn)行EGF處理,向每個(gè)培養(yǎng)孔中加入終濃度分別為O.lngmllngmllOngml的EGF各20ul每個(gè)劑量組重復(fù)3個(gè)孔。同樣,用0.
2、25%的胰蛋白酶消化后的Hep2單細(xì)胞懸液(細(xì)胞密度為2x104ml)接種于3塊%孔板中,200u1孔,24h后細(xì)胞貼壁生長,進(jìn)行EGF處理,向每個(gè)培養(yǎng)孔中加入終濃度分別為O.OlngmlO.lngmllngml的EGF各20u1,每個(gè)劑量組重復(fù)3個(gè)孔。于EGF處理后,繼續(xù)培養(yǎng)612244872h,用MT比色分析法對這兩種癌細(xì)胞株進(jìn)行測定A值,根據(jù)A值的變化來觀察EGF對Colo26Hep2細(xì)胞株體外增殖的最佳時(shí)間效應(yīng)。通過以上步驟,取
3、得EGF對Colo26Hep2細(xì)胞株體外增殖的最佳劑量及時(shí)間效應(yīng)后,用0.25%的胰蛋白酶消化后的Colo26Hep2單細(xì)胞懸液(細(xì)胞密度為3x104ml)接種在24孔培養(yǎng)板上,每個(gè)培養(yǎng)孔中放置一小玻片,lmlR24h后細(xì)胞貼壁生長,再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理,每種化療藥物各重復(fù)3個(gè)孔。對照組:Colo26Hep2細(xì)胞株中只加入化療藥物5FU(培養(yǎng)孔內(nèi)終濃度為25單gml)及DDP(培養(yǎng)孔內(nèi)終濃度為24ugml)各loin,觀察48h后,取出作用后
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