利用光譜技術(shù)研究X-rays與Hep-2細(xì)胞的相互作用.pdf

1、光譜技術(shù)是一種高度靈敏的檢測(cè)手段，是精確地分析和了解物質(zhì)結(jié)構(gòu)、成分及其含量行之有效的方法，適合于對(duì)生物分子和細(xì)胞狀態(tài)以及分子所處微環(huán)境的物理化學(xué)特性進(jìn)行研究，目前國(guó)內(nèi)外利用光譜技術(shù)在物理、化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)工程、食品等眾多領(lǐng)域都做出很多有意義的成果。X-rays是一種短波長(zhǎng)的電磁波，與腫瘤細(xì)胞作用后會(huì)引起細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、脂類、核酸等生物大分子的損傷與修復(fù)，同時(shí)還會(huì)啟動(dòng)腫瘤細(xì)胞內(nèi)的某些凋亡機(jī)制，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自然凋亡。因此X-rays一直被廣泛應(yīng)

2、用于腫瘤的放射治療，但就臨床上來(lái)講，目前在腫瘤的放療的放射劑量上還沒(méi)有一個(gè)十分科學(xué)的依據(jù)，往往依據(jù)于醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)，有較大的主觀性。本文對(duì)經(jīng)過(guò)受不同劑量X-rays照射的人上皮樣喉癌細(xì)胞(Hep-2)及其培養(yǎng)過(guò)該受照細(xì)胞的培養(yǎng)基(RPMIl640+10﹪胎牛血清)的吸收光譜進(jìn)行了研究，利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)經(jīng)不同劑量X-rays照射的Hep-2細(xì)胞進(jìn)行了檢測(cè)，旨在利用光譜技術(shù)來(lái)反映不同劑量的X-rays與Hcp-2細(xì)胞的相互作用的特性，揭示這一相

3、互作用與X-ravs的照射引起細(xì)胞凋亡的關(guān)聯(lián)性，進(jìn)而試圖為臨床X-ravs放射治療喉癌提供最佳劑量的參考。 論文從以下四個(gè)方面展開試驗(yàn)研究工作，并得出了以下重要結(jié)論： 1、研究了受不同劑量X-rays照射后繼續(xù)培養(yǎng)24h、48h、72h的Hep-2細(xì)胞的紫外吸收光譜，分析了其中蛋白質(zhì)的紫外吸收特性。結(jié)果表明：(1)Hep-2細(xì)胞受不同劑量X-rays照射后繼續(xù)培養(yǎng)不同時(shí)間，它們的吸收譜不同，這一方面與細(xì)胞生長(zhǎng)周期有關(guān)，另

4、一方面與X-rays的照射有關(guān)；(2)受照細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)48h時(shí)的吸收譜更具有特征性，此時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于對(duì)照組位于252nm附近的吸收帶都有不同程度的紅移現(xiàn)象，X-rays的照射延緩了癌細(xì)胞正常的細(xì)胞周期，對(duì)細(xì)胞的增殖起到的抑制作用； (3)不同劑量的X-rays對(duì)Hep-2細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)(氨基酸)、核酸的傷害及修復(fù)程度不同，其程度可以通過(guò)細(xì)胞紫外吸收光譜的變化得到反映。 2、研究了受不同劑量X-rays照射的H印-2細(xì)胞的FTIR光

5、譜。結(jié)果表明：1454 cm<'-1>譜線逐漸藍(lán)移1-3cm<'-1>、140cm<'-1>譜線逐漸紅移1-3cm<'-1>，2847cm<'-1>譜線逐漸藍(lán)移4-8 Cm<'-1>，8Gy劑量組藍(lán)移最大為8cm<'-1>。表明這些譜線對(duì)應(yīng)的基團(tuán)構(gòu)象的改變。另外在所設(shè)定的各劑量組癌細(xì)胞吸收光譜中，吸收峰強(qiáng)度比I<,1654>/I<,1542>、I<,1454>/I<,1400>、I<,2958>/I<,2847>變化明顯，其中均以8Gy

6、劑量組最為明顯，根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)，表明該劑量組細(xì)胞的癌化程度最小。從而初步斷定，在所設(shè)計(jì)的各劑量中，8Gy效果最好。 3、研究了受不同劑量X-rays照射后繼續(xù)培養(yǎng)24h、48h、72h的Hop-2細(xì)胞的培養(yǎng)基RPMI1.640(含10﹪胎牛血清)的紫外吸收光譜，分析了其中蛋白質(zhì)的紫外吸收特性。結(jié)果表明：經(jīng)X-rays照射后的Hep-2細(xì)胞在繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程中，其培養(yǎng)基的紫外吸收光譜隨時(shí)間變化明顯，這與細(xì)胞消耗培養(yǎng)基中的氨基酸成分、

7、向培養(yǎng)基中排泄代謝物及細(xì)胞的凋亡與壞死有關(guān)，對(duì)于照射組，后一因素起到主導(dǎo)作用。而細(xì)胞的壞死與凋亡與X-rays的照射劑量密切相關(guān)。 4、利用流式細(xì)胞技術(shù)、采用．Annexin V-FITC/PI(Almcxin V-Fluorcsccinisothiocynatc/propidinc iodide)雙染法初步的檢測(cè)了Hcp-2細(xì)胞在受不同劑量的X-rays照射后繼續(xù)培養(yǎng)48h時(shí)的凋亡率，結(jié)果表明：X-rays明顯引起了Hep-