鵝脂蛋白脂酶（LPL）cDNA序列克隆及其在動(dòng)物脂肪酶超家族中的進(jìn)化研究.pdf

1、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase，LPL)是脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶。本實(shí)驗(yàn)從天府肉鵝腿肌中抽取總RNA，通過RT-PCR反應(yīng)擴(kuò)增LPL基因的部分mRNA序列，分析LPL基因的結(jié)構(gòu)特征及序列變異特點(diǎn)，探討LPL基因的結(jié)構(gòu)與功能及其在脂肪酶超家族基因間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。結(jié)果表明： 1、獲得的LPL基因序列長度為879bp，GenBank登錄號(hào)為EF620913編碼293個(gè)氨基酸，核苷酸序列與雞LPL的mRNA具有92-38

2、％的相似性，與其它物種的序列也具有較高的相似性。 2、鵝LPL基因的氨基酸組成包含20種氨基酸，其中亮氨酸含量(8.90％)最高，賴氨酸(7.88％)次之，色氨酸(1.37％)和蛋氨酸(1.74％)含量較低；鵝LPL基因293個(gè)氨基酸序列與雞LPL基因間存在13個(gè)氨基酸位點(diǎn)的變異，占全部位點(diǎn)的4.44％：與哺乳動(dòng)物間存在91個(gè)氨基酸變異位點(diǎn)，其中單態(tài)變異位點(diǎn)44個(gè)，占總變異位點(diǎn)數(shù)的48.35％。 3、在天府肉鵝LPL蛋白

3、中，α-螺旋(α-helix)所占的比例較高，為31.85％，擴(kuò)展鏈(Extended strand)的比例為20.89％，無規(guī)卷曲(Random coil)的比例為47.26％，三者交替分布，形成LPL蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)。 4、天府肉鵝LPL結(jié)構(gòu)中存在4個(gè)二硫鍵、3個(gè)N-鏈接糖基化位點(diǎn)、1個(gè)肝素結(jié)合位點(diǎn)、1個(gè)脂蛋白酶催化三聯(lián)體位點(diǎn)、1個(gè)脂質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)、1個(gè)介導(dǎo)脂蛋白與LDL受體結(jié)合的位點(diǎn)，1個(gè)PLAT結(jié)構(gòu)域和1個(gè)對(duì)LPL二聚體形成必