脂肪酶的生物制備以及復(fù)合脂肪酶系的篩選.pdf

1、在自然界中脂肪酶不但可以進(jìn)行脂類的水解還能催化酯化反應(yīng)的進(jìn)行。因此可以以地溝油或工業(yè)廢油和低碳醇為原料用來(lái)合成生物柴油。而將脂肪酶進(jìn)行有效的固定化方法，可以增強(qiáng)脂肪酶的穩(wěn)定性和回收效率，以達(dá)到脂肪酶的有效利用。本文旨在對(duì)脂肪酶進(jìn)行生物制備并對(duì)脂肪酶進(jìn)行篩選，篩選出有增強(qiáng)效果的復(fù)合脂肪酶系，為多層、定向、比例可控模式的新型復(fù)合脂肪酶固定化方法提供脂肪酶選擇的基礎(chǔ)。
　　本實(shí)驗(yàn)以畢赤酵母為表達(dá)載體，對(duì)假絲酵母Candidasp.99-

2、125脂肪酶，南極假絲酵母脂肪酶以及米氏根酶脂肪酶共計(jì)18種脂肪酶進(jìn)行生物制備。并以對(duì)硝基苯基棕櫚酸酯為底物測(cè)定脂肪酶對(duì)長(zhǎng)鏈脂類的水解能力，對(duì)硝基苯基月桂酸酯和對(duì)硝基苯基辛酸酯測(cè)定脂肪酶對(duì)中鏈脂類的水解能力，對(duì)硝基苯基丁酸酯測(cè)定脂肪酶對(duì)短鏈脂肪酶的水解能力。篩選出具有水解優(yōu)勢(shì)的脂肪酶。以油酸、棕櫚酸、月桂酸、辛酸分別與甲醇進(jìn)行酯化反應(yīng)，測(cè)定脂肪酶的酯化活性，將水解活性最高脂肪酶與酯化活性最高脂肪酶組成復(fù)合酶體系，并測(cè)定其組合體系的復(fù)合效