基于痘病毒的溶瘤病毒及其溶瘤效應(yīng)的研究.pdf

1、腫瘤生物治療技術(shù)是近年來因生物技術(shù)發(fā)展而興起的一種腫瘤治療手段，是指采用生物制劑，直接或通過調(diào)節(jié)宿主的腫瘤防御機制間接抑制或消除腫瘤生長的一種治療方法，被認為是除手術(shù)、化療、放療之外的第四種腫瘤治療模式。能特異性殺傷腫瘤細胞的溶瘤病毒是腫瘤生物治療中重要的方法之一，也是當前腫瘤治療基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用的熱點與發(fā)展方向。近年來國際上應(yīng)用重組痘苗病毒進行腫瘤生物治療取得了重大進展，開發(fā)出了新一代溶瘤病毒，臨床試驗顯示對肝癌等惡性腫瘤具有較好的

2、療效，且具有良好的穩(wěn)定性和安全性。
　　痘苗病毒(vaccinia virus，VACV)是痘病毒家族成員之一，世界性天花消除過程中發(fā)揮了重要作用。生物醫(yī)學(xué)工作者對VACV的生物學(xué)特性、致病性、免疫性等諸多方面已有了較為透徹的了解。近年來，國外一些學(xué)者致力于將重組痘苗病毒(rVACV)應(yīng)用于腫瘤的生物治療，其中一些研究已取得較大突破，特別是JX-594已進入Ⅲ期臨床試驗，為最終攻克腫瘤帶來了新的希望，應(yīng)用前景十分廣闊，但國內(nèi)的同類

3、研究目前尚未見報道。
　　本課題擬以VACV的細胞毒性為切入點，利用基因重組技術(shù)，敲除野生型VACV的VGF和/或TK基因，獲得具有腫瘤靶向性的溶瘤病毒VACV-VGF-、VACV-TK-和vvDD，并對這些重組病毒的體內(nèi)外復(fù)制特性、致病性、抗腫瘤效應(yīng)等進行了研究。
　　研究結(jié)果表明，體外在所檢測的幾株細胞中包括CV-1、BSC-1、Vero、Hela細胞中病毒都可以較好地復(fù)制，而在B16.F10和CT26.WT細胞中病毒的

4、復(fù)制受到了限制;MTS法細胞毒性實驗中，針對不同的細胞各病毒的殺傷力有所不同，且對B16.F10細胞基本不表現(xiàn)殺傷作用;在小鼠黑色素瘤模型中，相比于野生型VACV，rVACV主要集中分布于腫瘤組織中，且在病毒注射Day9時除VACV-VGF-外，VACV-TK-和vvDD在腦、脾等非腫瘤組織中幾乎檢測不到，而腫瘤組織中高達108 pfu/100mg;相比于野生型病毒，重組病毒注射后小鼠生存時間不同程度有所延長，但相對VACV-VGF-或