攜帶ST13基因的雙調(diào)控溶瘤腺病毒治療結(jié)腸癌的研究.pdf

1、在發(fā)達國家，結(jié)直腸癌發(fā)病率和致死率均列第二位。世界上每年約有100萬新增病例，大約50萬患者因此失去生命。過去的幾十年，盡管手術(shù)治療，放療和化療得到長足發(fā)展，但對于中晚期癌癥患者仍束手無策。因此研制開發(fā)更為有效的癌癥治療方案顯得非常必要和緊。 溶瘤病毒也稱腫瘤特異性增殖病毒是一類很有應用前景的抗腫瘤藥物。它能特異性的在腫瘤細胞中復制、增殖，從而殺死腫瘤細胞，而對正常細胞毒性很小。例如，ONYX-015是通過缺失腺病毒E1B55-

2、kD基因?qū)崿F(xiàn)特異性殺傷腫瘤細胞的一種溶瘤病毒。臨床實驗證明其具有很好的安全性，但也有其單獨使用療效不很理想的缺陷性。為進一步提高溶瘤病毒的抗腫瘤效果，我們提出了一種新策略：即在溶瘤病毒中引入殺傷或抑癌基因，聯(lián)合基因治療與病毒治療各自的優(yōu)勢來治療腫瘤，并稱之為腫瘤的靶向基因-病毒治療。 本論文利用雙調(diào)控溶瘤腺病毒載體SG500攜帶結(jié)腸癌特異性抑癌基因ST13構(gòu)建一種全新的雙靶向基因-病毒SG500-ST13。該載體的E1A和E1B

3、基因分別受腫瘤特異性啟動子hTERT和HRE的控制，ST13基因則位于病毒的E1A基因之后。我們首先通過基因克隆的方法將ST13基因插入到腺病毒穿梭載體pSG500中，得到pSG500-ST13(見附錄)，繼而在HEK293細胞中通過同源重組法得到雙靶向基因-病毒SGS00-ST13。 體外實驗結(jié)果顯示，SG500-ST13對結(jié)腸癌細胞系(HCT116、SW620和HT29)具有明顯的細胞毒性效應，而對正常細胞系(WI38)沒有